Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
The contents of total cholesterol (TC) and triglycerides (TG) in nasopharyngeal aspirate were studied in 233 mature newborns from mothers with normal pregnancy and complicated with cytomegalovirus infection (CMVI). The first (control) group included 30 babies of 38-40 weeks from mothers with physiological course of pregnancy. Among the newborns with moderate cerebral ischemia and antenatal history complicated with chronic CMVI in their mothers in the second trimester of pregnancy, four groups were distinguished and each of them was divided into two subgroups. Subgroup A had patients whose mothers did not have the threat of miscarriage during pregnancy and subgroup B had children from mothers who had the threat of miscarriage in the second trimester of gestation. The second group included 50 newborns whose mothers had a latent course of chronic CMVI; the third group included 50 children from mothers with reactivation of chronic CMVI (antibody titers of IgM to CMV were 1:200-1:400, antibody titers of IgG to CMV were 1:200-1:400, the avidity index of IgG antibodies to CMV was more than 65%); the fourth group consisted of 51 newborns whose mothers suffered an acute form of chronic CMVI (antibody titers of IgM to CMV were 1:200-1:400, antibody titers of IgG to CMV were 1:200-1:800, avidity index of IgG antibodies to CMV was more than 65%); and the fifth group had 52 children from mothers who suffered a reactivation of chronic CMVI (antibody titers of IgM to CMV were 1:200-1:400, antibody titers of IgG to CMV were 1:400-1:600, avidity index of IgG antibodies to CMV was more than 65%). The children of 2A, 3A and 4A subgroups, in comparison with the first group, in nasopharyngeal aspirate did not have any significant changes in the contents of TC and TG. In 5A subgroup against the absence of reliable differences of TG concentration there was registered a fall of TC level till 0.189±0.015 mmole/L (in control and 2A subgroup it was 0.250±0.016 mmole/L, p<0.01 and 0.246±0.015 mmole/L, p<0.01, respectively). When comparing the lipid composition of nasopharyngeal aspirate in newborns of 2B and 3B subgroups with the one taken from healthy children there were not found any significant differences in TC and TG. But in 4B and 5B subgroups there was a fall of TC till 0.191±0.014 mmol/L (p<0.01) and till 0.146±0.010 mmole/L (p<0.001), while the values of TG grew till 0.169±0.009 mmole/L (p<0.05) and till 0.198±0.009 mmole/L (p<0.001); at the same time the contents of TG in the first group was only 0.142±0.008 mmole/L. Thus in newborns with moderate cerebral ischemia and antenatal history complicated with 4 times growth of antibody titers of IgG to CMV and the threat of miscarriage in the second trimester of gestation, the decrease of TC can lead to less expressed compensatory-adaptive reactions, and the increase of TG, including fatty acids peroxides, results in the starting of mechanisms of intrauterine degradation of pulmonary surfactant and membrane-destructive processes in central nervous system.
nasopharyngeal aspirate, cerebral ischemia, newborns, cytomegalovirus infection, pregnancy, threatened miscarriage
В оценке структурно-функционального состояния респираторной и центральной нервной систем у новорожденных с отягощенным антенатальным анамнезом важная роль отводится исследованию аспирата из дыхательных путей [1, 4, 6]. Поэтому изучение липидов назофарингеального аспирата, участвующих в формировании сурфактантной и ликворной системы у детей при рождении, позволяет установить патогенез антенатально индуцированной патологии органов дыхания и головного мозга у потомства, матери которых перенесли реактивацию хронической цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) во втором триместре беременности, неосложненной и осложненной угрозой невынашивания.
Целью работы явилось изучение содержания общего холестерина (ОХС) и триглицеридов (ТГ) в назофарингеальном аспирате при церебральной ишемии средней степени тяжести у новорожденных от матерей с ЦМВИ в период беременности.
Материалы и методы исследования
Проводилось изучение содержания ОХС и ТГ в назофарингеальном аспирате у 233 доношенных новорожденных от матерей с физиологической беременностью, а также с латентным течением и реактивацией хронической ЦМВИ во втором триместре гестации. Обследованные дети были разделены на 5 групп.
В первую группу (контрольную) вошли 30 новорожденных, матери которых не имели осложнений в период беременности. При серологическом исследовании у женщин в сыворотках крови (парных) не выявлялись титры антител IgG и IgM к цитомегаловирусу (ЦМВ). Однако определялись титры антител IgG к вирусу простого герпеса 1 типа (ВПГ-1) 1:200-1:400 при отсутствии роста в динамике титров антител IgG к ВПГ-1 1:200-1:400 и индексе авидности антител IgG к ВПГ-1 более 65%.
При изучении липидов назофарингеального аспирата у детей с церебральной ишемией средней степени тяжести и внутриутробным развитием, осложненным хронической ЦМВИ, выделялись вторая, третья, четвертая и пятая группы, в каждой из которых было 2 подгруппы: подгруппа А – новорожденные от матерей, не имеющих угрозы невынашивания; подгруппа Б – дети, матери которых перенесли реактивацию хронической ЦМВИ во втором триместре гестации, осложненной угрозой невынашивания.
Вторую группу (основную) составили 50 новорожденных от матерей с латентным течением хронической ЦМВИ (титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:400, индекс авидности IgG к ЦМВ более 65%), ассоциированной с латентным течением герпесвирусной (ВПГ-1) инфекции (титры антител IgG к ВПГ-1 1:200-1:400, индекс авидности IgG к ВПГ более 65%) во втором триместре беременности. Во 2А и во 2Б подгруппы вошли по 25 детей.
В третью группу вошли 50 детей, матери которых перенесли реактивацию хронической ЦМВИ (титры антител IgM к ЦМВ 1:200-1:400 без четырехкратного роста титров антител IgG к ЦМВ 1:200-1:400 и индекс авидности антител IgG к ЦМВ более 65%) на фоне латентной герпесвирусной инфекции (титры антител IgG к ВПГ-1 1:200-1:400 и индекс авидности IgG к ВПГ более 65%). Подгруппа 3А включала 25 детей, и 3Б – 25 пациентов..
Четвертая группа была представлена 51 новорожденным от матерей с реактивацией хронической ЦМВИ (титры антител IgM к ЦМВ 1:200-1:400, антитела IgG к ЦМВ 1:200-1:800 и индекс авидности IgG к ЦМВ более 65%) и с признаками латентной герпесвирусной инфекции (титры антител IgG к ВПГ-1 1:200-1:400, индекс авидности IgG к ВПГ более 65%). В 4А подгруппе находились 26 новорожденных, в 4Б подгруппе – 25 детей.
Пятую группу составили 52 новорожденных, матери которых перенесли реактивацию хронической ЦМВИ (титры антител IgМ к ЦМВ 1:200-1:400, четырехкратный рост титров антител IgG к ЦМВ 1:400-1:1600 и индекс авидности IgG к ЦМВ более 65%) на фоне латентного течения герпесвирусной инфекции (титры антител IgG к ВПГ-1 1:200-1:400, индекс авидности IgG к ВПГ более 65%). Подгруппа 5А состояла из 27 детей, подгруппа 5Б – из 25 новорожденных.
В основную группу были включены: 1) доношенные новорожденные с церебральной ишемией средней степени тяжести и антенатальным анамнезом, отягощенным латентным течением и реактивацией хронической ЦМВИ во втором триместре беременности, неосложненной и осложненной угрозой невынашивания; 3) дети, у которых внутриутробное развитие не было осложнено липидемией, ожирением 1-3 степени, эндокринными заболеваниями, среднетяжелой и тяжелой соматической и акушерской патологией у матерей во втором триместре беременности; 3) доношенные от матерей с беременностью, неосложненной другими ТОRCH-инфекциями.
Критерии исключения: 1) церебральная ишемия легкой и тяжелой степени у детей от матерей с одноплодной и многоплодной беременностью, а также с острыми и обострением хронических заболеваний, обусловленных другими инфекциями; 2) новорожденные, матери которых страдали среднетяжелой, тяжелой соматической и акушерской патологией в период беременности; 3) дети от матерей с истмико-цервикальной недостаточностью и аномалиями развития матки; 4) крупные новорожденные и дети, рожденные от матерей с помощью операции кесарева сечения; 4) дети от матерей, которые отказались участвовать в настоящем исследовании.
При установлении формы хронической ЦМВИ и активности инфекционного процесса у матерей во втором триместре беременности использовали иммуноферментный анализ (реагенты ЗАО «Вектор-Бест»), а индекса авидности антител IgG к ЦМВ и IgG к ВПГ-1 – «Вектор ЦМВ – IgG – авидность» и «Вектор ВПГ – IgG – авидность» (Россия).
Диагностика формы ЦМВИ у матерей во втором триместре беременности осуществлялась в парных сыворотках крови (при первом обследовании и через 12-14 дней) с помощью наборов реагентов ЗАО «Вектор-Бест», а индекса авидности антител IgG к ЦМВ и IgG к ВПГ-1 – «ВекторЦМВ − IgG – авидность» и «Вектор ВПГ − IgG – авидность» (Россия). Забор назофарингеального аспирата для биохимического анализа у новорожденных включал следующие этапы:
- после рождения ребенка с кожи носогубного треугольника и наружной части носа стерильным ватным тампоном удалялись частицы амниотической жидкости и мекониальные массы;
- для получения назофарингеального аспирата к стерильному шприцу присоединялось устройство, состоящее из мягкого полихлорвинилового зонда [7];
- осуществлялось осторожное введение зонда в полость носа новорожденному;
- из носоглотки шприцем медленно насасывалось 2,5-3 мл биологической жидкости;
- полученная биологическая жидкость центрифугировалась на центрифуге при 1500 об/мин в течение 10 минут для получения её надосадочной части, в которой определялось содержание (ммоль/л) ОХС, ЛПВП, ЛПНП и ТГ с помощью стандартных наборов реагентов на анализаторе фирмы «Beckman Coulter, Inc» (США).
В работе учитывались требования Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения медицинских исследований с участием человека в качестве субъекта» с поправками 2013 г. и нормативных документов «Правила надлежащей клинической практики в Российской Федерации», утвержденных Приказом №200н от 01.04.2016 МЗ РФ. Работа одобрена Комитетом по биомедицинской этике ДНЦ ФПД в соответствии с принципами конвенции о биомедицине и правах человека, а также общепризнанными нормами международного права, от всех здоровых и больных лиц было получено информированное согласие.
Статистическая обработка и анализ данных осуществлялась с использованием стандартного пакета прикладных программ Statistica 6.1. Анализируемые в работе количественные данные имели нормальное распределение, поэтому рассчитывалась достоверность различий значений по Стьюденту − вычисление средней арифметической (М), средней ошибки (m). Во всех процедурах статистического анализа критический уровень значимости нулевой статистической гипотезы (p) принимался равным 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
Из таблицы 1 видно, что в носоглоточном аспирате у новорожденных 2А, 3А и 4А подгрупп по сравнению с первой группой не обнаруживались достоверные изменения уровня ОХС и ТГ. У детей 5А подгруппы в сопоставлении с контролем отсутствовали достоверные изменения содержания ТГ, но в тоже время статистически достоверно (р<0,01) снижалась концентрация ОХС. Вышеуказанные изменения липидного спектра назофарингеального аспирата у доношенных новорожденных c отягощенным антенатальным анамнезом могут отражать негативное влияние высокого иммунного ответа матерей на ЦМВ, ассоциированного с ростом токсичности аспирированных околоплодных вод [1]
Таблица 1
Изменение содержания ОХС и ТГ при церебральной ишемии средней степени тяжести у доношенных новорожденных от матерей с латентным течением и реактивацией хронической ЦМВИ во втором триместре беременности (М±m)
|
Исследуемые группы |
Биохимические показатели, ммоль/л |
|
|
ОХС |
ТГ |
|
|
Первая группа |
0,250±0,016 |
0,142±0,008 |
|
2А подгруппа |
0,246±0,015 р1>0,05 |
0,143±0,007 р1>0,05 |
|
3А подгруппа |
0,234±0,017 р1>0,05; p2>0,05 |
0,148±0,008 р1>0,05; p2>0,05 |
|
4А подгруппа |
0,214±0,016 р1>0,05; p2>0,05; p3>0,05 |
0,156±0,009 р1>0,05; p2>0,05; p3>0,05 |
|
5А подгруппа |
0,189±0,015 р1<0,01; p2>0,05; p3>0,05; p4>0,05 |
0,165±0,010 р1>0,05; p2>0,05; p3>0,05; p4>0,05 |
Примечание: р1 – уровень значимости различий по сравнению с показателями первой группы; р2 – то же с показателями 2А подгруппы; р3 – то же с показателями 3А подгруппы; р4 – то же с показателями 4А подгруппы.
Сравнение содержания липидов в назофарингеальном аспирате у детей 2Б и 3Б подгрупп с таковым у здоровых новорожденных не выявили статистически значимых различий концентрации ОХС и ТГ. У пациентов 4Б и 5Б подгрупп, напротив, отмечалось достоверное падение уровня ОХС на фоне роста концентрации ТГ (табл. 2).
Таблица 2
Изменение содержания ОХС и ТГ при церебральной ишемии средней степени тяжести у доношенных новорожденных от матерей с латентным течением и реактивацией хронической ЦМВИ во втором триместре беременности, осложненной угрозой невынашивания (М±m)
|
Исследуемые группы |
Биохимические показатели, ммоль/л |
|
|
ОХС |
ТГ |
|
|
Первая группа |
0,250±0,016 |
0,142±0,008 |
|
2Б подгруппа |
0,233±0,015 р1>0,05 |
0,144±0,008 р1>0,05 |
|
3Б подгруппа |
0,221±0,016 р1>0,05; p2>0,05 |
0,151±0,009 р1>0,05; p2>0,05 |
|
4Б подгруппа |
0,193±0,015 р1<0,05; p2>0,05; p3>0,05 |
0,169±0,009 р1<0,05; p2>0,05; p3>0,05 |
|
5Б подгруппа |
0,146±0,010 p1<0,001; p2>0,05; p3>0,05; p4>0,05 |
0,198±0,009 p1<0,001; p2>0,05; p3>0,05; p4>0,05 |
Примечание: р1 – уровень значимости различий по сравнению с показателями первой группы; р2 – то же с показателями 2Б подгруппы; р3 – то же с показателями 3Б подгруппы; р4 – то же с показателями 4Б подгруппы.
Снижение содержания ОХС и увеличение ТГ в носоглоточном аспирате при церебральной ишемии средней степени тяжести у новорожденных 5Б подгруппы по сравнению с таковым у детей контрольной группы, по-видимому, связано с ацидозом и токсичностью аспирированной амниотической жидкости [1, 6], которые влияют на активность ферментных систем и строение альвеолоцитов и эндотелиоцитов лёгких [5, 8], а также на структурно-функциональную организацию эндотелия и эпендимоцитов ликворных путей головного мозга [2, 3] при реактивации хронической ЦМВИ у их матерей во втором триместре беременности, осложненном угрозой невынашивания. В то же время четко выраженные различия (р<0,05) между содержанием ОХС и ТГ в 5Б и 5А подгруппах указывают на значение угрозы невынашивания инфекционного генеза в стимуляции дислипидемии в носоглоточном аспирате в результате избыточного поступления антигенов возбудителей и их токсинов через гематоплацентарный барьер в околоплодные воды.
Выводы
- У доношенных новорожденных с церебральной ишемией средней степени тяжести и антенатальным анамнезом, отягощенным латентным течением хронической ЦМВИ (титры антител IgM к ЦМВ 1:200-1:400, титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:400 и индекс авидности IgG к ЦМВ более 65%) на фоне хронической герпесвирусной инфекции во втором триместре гестации, неосложненном и осложненном угрозой невынашивания, в сопоставлении со здоровыми детьми аналогичного возраста не наблюдается достоверных изменений ОХС и ТГ в носоглоточном аспирате.
- Церебральная ишемия средней степени тяжести у детей, матери которых перенесли реактивацию хронической ЦМВИ с титрами антител IgM к ЦМВ 1:200-1:400, без четырехкратного роста титров антител IgG 1:400-1:800 и индексом авидности IgG к ЦМВ более 65% во втором триместре гестации, по сравнению с детьми от матерей с физиологическим течением беременности, сопровождается тенденцией к снижению в назофарингеальном аспирате ОХС и к увеличению содержания ТГ.
- При церебральной ишемии средней степени тяжести у новорожденных с антенатальным анамнезом, отягощенным реактивацией хронической ЦМВИ (титры антител IgM к ЦМВ 1:200-1:400, титры антител IgG к ЦМВ 1:400-1:1600 и индекс авидности IgG к ЦМВ более 65%) во втором триместре беременности и угрозой невынашивания, по сравнению со здоровыми детьми и пациентами с аналогичной патологией центральной нервной системы, матери которых перенесли острую фазу хронической ЦМВИ (титры антител IgM к ЦМВ 1:200-1:400, титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:800 и индекс авидности IgG к ЦМВ более 65%) во втором триместре гестации, неосложненной угрозой невынашивания, в носоглоточном аспирате снижается концентрация ОХС и регистрируются более высокие показатели ТГ. Это снижает устойчивость органов дыхания и центральной нервной системы у новорожденных к неблагоприятным факторам в период их внутриутробного и постнатального развития.
1. Gorikov I.N. Physical-biochemical properties of nasopharyngeal aspirate at moderate cerebral ishemia in the mature newborns from mothers with reactivation of chronic cytomegalovirus infection during pregnancy. Bulleten' fiziologii i patologii dyhaniâ 2015; 57:84-88 (in Russian).
2. Gorikov I.N., Lutsenko M.T., Andrievkaya I.A., Sudakov A.G. Pathomorphological changes in the cerebrospinal fluid system in ventriculomegaly in newborns from mothers with reactivation of chronic cytomegalovirus infection during pregnancy. Sovremennyy mir, priroda i chelovek 2016; 6(2):74-74 (in Russian).
3. Gorikov I.N., Lutsenko M.T., Andrievkaya I.A. Serological, clinical-ultrasound and morphological characteristics of congenital cytomegalovirus infection in ventriculomegaly in newborns with cerebral ischemia. Sovremennyy mir, priroda i chelovek 2016; 6(2):76-78 (in Russian).
4. Zaplatnikov A.L., Korovina N.A., Korneva M.Yu., Cheburkin A.V. Intrauterine infections: diagnosis, treatment, prevention. Lechaschiy vrach 2005; 8:24-27 (in Russian).
5. Lutsenko M.T. Morphofunctional changes in the lungs of fetus in intrauterine cytomegalovirus infection. Bûlleten' fiziologii i patologii dyhaniâ 2014; 53:95-98 (in Russian).
6. Gorikov I.N., Samsonov V.P., Nakhamchen L.G. Patent 2342668 RU. A method for diagnosing endotoxicosis in newborns with intrauterine viral and viral-bacterial infections; published 27.12.2008 (in Russian).
7. Gorikov I.N., Lutsenko M.T., Samsonov V.P., Nakhamchen L.G., Ushakova E.B., Kostromina N.O. Patent 2392974 RU. Device for aspiration of biological fluid from the nasal cavity and nasopharyngeal space in newborns; published 27.06.2010 (in Russian).
8. Shastina G.V., Tsinzerlihg A.V. The association of pneumopathies with intrauterine infections in children who died in the early neonatal period. Voprosy okhrany materinstva i detstva 1991; 36(10):34-37 (in Russian).
