Москва, г. Москва и Московская область, Россия
Последствия для развития и функционирования иммунной системы потомства активации иммунной системы матери во время беременности являются малоизученными и представляют большой интерес как в теоретическом, так и практическом плане. Целью исследования было изучить морфологические изменения тимуса у потомства самок мышей, подвергшихся на ранних сроках беременности однократному иммуностимулирующему воздействию Т-клеточным митогеном кон-канавалином А, и контрольных самок после введения полулетальной дозы эндотоксина грамотрицательных бактерий. Эксперимент выполнен на 44 самцах мышей C57BL/6 в возрасте 2,5 нед. Животных выводили из эксперимента через 24 и 48 чч. после введения липополисахарида Е. coli в дозе 15 мг/кг. Проводили органометрическое, гистологическое и морфометрическое исследование тимуса. Морфологические и гистофизиологические изменения тимуса мышей контрольной и опытной групп имеют схожий характер (акцидентальная инволюция, миграция зрелых тимоцитов, уменьшение числа тучных клеток), но у потомства, подвергшегося пренатальному воздействию, акцидентальная инволюция и миграция зрелых тимоцитов развиваются более медленно и в меньшей степени. Эти данные указывают на снижение реактивности иммунной системы потомства, подвергшегося на раннем этапе пренатального развития массивному воздействию цитокинов, секретируемых материнскими лимфоцитами под влиянием конканавалина А.
тимус, морфология, эндотоксин, пренатальное воздействие, конканавалин А
Функционирование иммунной системы на разных этапах постнатального развития определяется степенью зрелости ее клеток и органов [8]. На пре- и постнатальный морфогенез органов иммунной системы оказывают влияние различные эндогенные и экзогенные факторы. По мнению ряда специалистов одной из причин, вызывающих изменения постнатального развития иммунной системы, является воздействие на иммунную систему матери во время беременности, влияющее на формирование органов иммунной системы плода [12-14]. Пренатальное воздействие может быть одной из причин увеличения заболеваний у детей, обусловленных нарушениями врожденного и приобретенного иммунитета, таких как инфекционные, аллергические, аутоиммунные и онкологические заболевания. Одним из малоизученных аспектов этой проблемы является возможность влияния экзогенных воздействий (лекарственных препаратов, бактериальных и вирусных инфекций и т.д.) на иммунную систему матери на первых неделях беременности до начала формирования органов иммунной системы эмбриона на дальнейшее формирование и функционирование иммунной системы потомства в постнатальном периоде развития.
Цель исследования - изучить морфологические изменения тимуса у потомства самок мышей, подвергшихся на ранних сроках беременности однократному иммуностимулирующему воздействию, и контрольных самок после введения полулетальной дозы эндотоксина грамотрицательных бактерий.
Материалы и методы исследования. Эксперименты проводили на 44 самцах мышей C57BL/6 в возрасте 2,5 нед. В возрасте 2 нед животные переводились на самостоятельное вскармливание. Самцы опытной группы (п=21) были получены от самок, которым на 7 сутки после оплодотворения, то есть до формирования органов иммунной системы плода [11], в качестве стимулятора иммунной системы был однократно введён Т-клеточный митоген конканавалин А в орбитальный синус в дозе 5мг/кг. 7ые сутки эмбрионального развития мыши соответствуют 2-3 неделе беременности человека [15]. В контрольную группу входили самцы (п=17), родившихся от самок, которым вводили в орбитальный синус аналогичный объем физиологического раствора. В возрасте 2,5 нед мышам опытной (п=13) и контрольной групп (п=10) в качестве эндотоксина внутрибрюшинно вводили LD50 липополисахарида (ЛПС) Е. coli штамм ОШ:В4 («Difco», США) 15мг/кг однократно. Часть мышей опытной (п=8) и контрольной групп (п=7) умерщвляли передозировкой диэтилового эфира до введения ЛПС. Через 24 и 48 чч выживших мышей выводили из эксперимента передозировкой диэтилового эфира. Определяли относительную массу тимуса. Проводили гистологическое исследование органа методом световой микроскопии и компьютерной морфо-метрии с помощью программы "ImageScope" ("Leica Microsystems Gmbh", Австрия). В гистологических препаратах тимуса, окрашенных гематоксилином и эозином, определяли долю коркового вещества, ширину субкапсулярного слоя, количество тимических телец в мм2 площади мозгового вещества, стадию их развития по О.В. Зайратьянцу [1]. В препаратах, окрашенных толуидиновым синим, подсчитывали количество выявляемых тучных клеток в мм2 среза, их средний гистохимический коэффициент (СПС), отражающий насыщенность клеток секреторным материалом, по формуле: доля очень темных
1. Болезни вилочковой железы / В.П. Харченко [и др.].-М.: Триада-Х, 1998.- 231 с.
2. Яглова, Н.В. Биология секреции тучных клеток / Н.В. Яглова, В.В. Яглов // Клиническая и экспериментальная морфология.- 2012.- №4.- С.4-10.
3. Яглова, Н.В. Влияние активации иммунной системы материнского организма в ранние сроки беременности на постнатальный морфогенез органов иммунной системы потомства / Н.В. Яглова, С.С. Обернихин // Проблемы репродукции.- 2013.- Т.19.- №1.- С.73-77.
4. Яглова, Н.В. Регуляторная роль тучных клеток в морфогенетических процессах органов иммунной системы потомства мышей, перенесших активацию иммунной системы в ранние сроки беременности / Н.В. Яглова, С.С. Обернихин // Клиническая и экспериментальная морфология-2013.- №2.- С. 62-68.
5. Яглова, Н.В. Тучные клетки и врожденный иммунитет. / Н.В. Яглова // Иммунология.- 2009.- Т.ЗО.- №2.- С.139-143.
6. Яглова, Н.В. Ультраструктурные проявления молекулярного способа выделения секреторного материала тучными клетками щитовидной железы при воздействии ли-пополисахарида / Н.В. Яглова, В.В. Яглов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины- 2013.- Т.155-№2.- С.229-232.
7. Яглова, Н.В. Цитофизиологические особенности популяции тучных клеток щитовидной железы при воздействии липополисахарида / Н.В. Яглова // Морфологические ведомости.- 2008.- №3-4.- С.94-98.
8. Ярилин, А.А. Возрастные изменения тимуса и Т-лимфоцитов / А.А. Ярилин // Иммунология.- 2003- №2 - С.117-128.
9. Crivellato, Е. The mast cell: an evolutionary perspective / E. Crivellato, D. Ribatti // Biol. Rev.- 2010.- Vol.85.- No.2.-P.347-360.
10. Differential responses of mast cell toll-like receptors 2 and 4 in allergy and innate immunity / V. Supajatura, [et al.] //J. Clin. Invest.- 2002.- Vol. 109.- No.10.- P.1351-1359.
11. Gordon, J. Mechanisms of thymus organogenesis and morphogenesis / J. Gordon, N. Manley // Development- 2011-Vol.138.-P. 3865-3878.
12. Maternal immune status in pregnancy is related to offspring´s immune responses and atopy risk / G. Herberth, [et al.]. // Allergy.- 2011.- Vol.66.- N.8.- P.1065-1074.
13. Merlot, E. Prenatal stress, fetal imprinting and immunity / E.Merlot, D. Couret, W. Often // Brain, Behavior, and Immunity.- 2008.- Vol. 22.- P.42-51.
14. Prenatal programming of the innate immune response following in utero exposure to inflammation: a sexually dimorphic process? / N. Hodyl [et al.]. // Expert Review of clinical immunology.- 2011.- Vol.7.- N.5.- P.579-592.
15. Theiler, K. The house mouse. Atlas of embryonic development / K. Theiler.- New York, 1989.- 132 p.
