УДК 636.5.034 Яйценоская домашняя птица
Антибактериальные препараты в системе птицеводства используются в целях профилактики и в качестве терапии инфекционной патологии. При интенсивном внедрении фармакологического препарата в производство важно выявить потенциальное наличие и характер отрицательного действия такого препарата на физиологическое состояние птицы. Серьезным достоинством нитрофуранов является сложность возникновения резистентности у широкого спектра микроорганизмов к препаратам этой группы. Цель исследования заключается в изучении морфофункциональных показателей крови цыплят при использовании фуразолидона. Анализ гематологических показателей крови свидетельствует об отсутствии отрицательного воздействия фуразолидона на физиологическое состояние цыплят при выпаивании в первые десять суток жизни в дозе 200 мг/л, по сравнению с аналогичными показателями в группе интактного контроля. Изученные показатели белых кровяных клеток характеризуют отсутствие отрицательного влияния исследуемого препарата на состояние иммунной системы цыплят. Использование фуразолидона не приводит к развитию интоксикации и возникновению воспалительных процессов в организме животных опытной группы. При анализе данных лейкограммы установлен гранулоцитоз у птиц группы опыта, сопровождающийся незначительной псевдоэозинофилией. Расчет лейкоцитарных индексов свидетельствует о несущественных отличиях от таковых в группе интактного контроля. При этом гематологические показатели находились в рамках нормативных значений. Не выявлено статистически значимых отличий между показателями лейкограммы в группах интактного контроля и опыта, к девятым суткам после отмены препарата. Значения лейкограммы цыплят группы опыта сравнялись с контрольными значениями к девятым суткам после отмены препарата, что свидетельствует об отсутствии критичного воздействия фуразолидона на организм.
фуразолидон, цыплята, кровь, лейкоциты, псевдоэозинофилы
Введение. Промышленное птицеводство является интенсивно развивающейся отраслью современного сельского хозяйства. При этом, настолько активное развитие приводит к возникновению трудностей, которые связаны с содержанием сельскохозяйственной птицы в условиях птицекомплекса. Например, слишком плотная посадка вызывает рост рисков заражения животных инфекциями, вспышки которых снижают продуктивность, а также могут приводить к массовой гибели птицепоголовья. Использование антимикробных препаратов для терапии и профилактики инфекционных заболеваний является вполне эффективным [1], однако важным является своевременное выявление возможного отрицательного действия антибиотика на физиологическое состояние животных. Отличительная особенность нитрофуранов – способность к быстрой утилизации в организме, при этом метаболиты, которые образуются при приеме препаратов этой группы, достаточно долго можно обнаружить в органах и тканях. Антимикробный эффект фуразолидона реализуется путем блокировки работы бактериальных ферментов, что ингибирует процессы клеточного дыхания, нарушает работу цикла Кребса, прекращает синтез нуклеиновых кислот и, как следствие, приводит к гибели микроба. Фуразолидон применяют при заражении грамположительными и грамотрицательными бактериями, кроме того он эффективен при кокцидиозе и трихомонадозе [2, 3, 4]. Известно, что у достаточно широкого спектра микроорганизмов редко развивается резистентность к нитрофуранам. Исходя из вышесказанного, важным является изучение последствий влияния нитрофуранов на показатели крови цыплят [5, 6, 7]. Особое внимание следует обратить на возможное изменение количества псевдоэозинофилов, как микрофагального компонента неспецифического иммунитета у птиц. Псевдоэозинофилы не дифференцируют объекты по антигенам, в связи с чем их часто рассматривают вне иммунной системы и не относят к иммунокомпетентным клеткам. Однако, полиморфноядерные лейкоциты используют специфические иммунные механизмы для осуществления своих функций.
Цель исследования – выявить изменения показателей белой крови цыплят при использовании фуразолидона.
Условия, материалы и методы. Исследования осуществлены на базе Белгородского филиала ФГБНУ «Федеральный научный центр – Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук» (Белгород). Для достижения поставленной цели, по принципу аналогов, были сформированы две группы суточных петушков кросса Хайсекс-Браун – контрольная (50 голов) и опытная (50 голов). Птицы контрольной интактной группы получали сбалансированный по всем компонентам основной рацион. Для цыплят опытной группы в дозе 200 мг/л на протяжении первых десяти суток жизни с водой вводили фуразолидон.
Отбор крови осуществлялся на первые, третьи, пятые, седьмые и девятые сутки после отмены препарата.
При исследовании гематологических показателей определяли количество лейкоцитов, лейкоцитарную формулу, а так же проводили расчет лейкоцитарных индексов.
Количество лейкоцитов подсчитывали с использованием камеры Горяева.
Расчет лейкоформулы осуществлен в относительных и абсолютных значениях, после чего определяли лейкоцитарные индексы: «лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс», «индекс Кребса» (индекс соотношения нейтрофилов и лимфоцитов), «лейкоцитарный индекс», «лейкоцитарный индекс интоксикации», «индекс сдвига лейкоцитов крови», «индекс иммунореактивности».
Статистическая обработка полученного цифрового материала осуществлена с использованием программы SPSS Statistic 17.0. В связи с небольшим объемом выборки статистическую значимость полученных результатов оценивали при помощи непараметрического критерия Манна-Уитни.
Результаты и обсуждение. Данные, полученные при подсчёте общего числа лейкоцитов, свидетельствуют о лейкопении, которая была выявлена у цыплят, получавших фуразолидон (рис. 1).
Рис. 1 – Динамика общего числа лейкоцитов цыплят, 109×л-1
Примечание: * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни при p<0,05.
Количество лейкоцитов в группе Ⅱ было ниже, чем в контрольной. Лейкопения может регистрироваться при угнетении функционирования органов кроветворения [8]. При этом, в целом, численность лейкоцитов нормализовалась к девятым суткам после отмены препарата.
Динамика лейкограммы крови цыплят обеих групп эксперимента была неоднозначной (табл. 1).
Обнаружены статистически значимые изменения количества базофилов в группе, получавшей фурозалидон на первые, третьи, седьмые и девятые сутки после отмены препарата. Увеличение содержания базофилов в периферичсекой крови цыплят можно связать с восприятием фуразолидона как антигена [9].
Количество эозинофилов возросло в крови цыплят в первые, третьи и седьмые сутки эксперимента (на 30%, 5% и 21% соответственно), и снизилось в сравнении с группой интактного контроля на пятые сутки на 10%, и на девятые, с разницей в 15%. Неоднозначная динамика эозинофилов свидетельствует о возникновении возможной реакции гиперчувствительности на препарат [10].
Таблица 1 - Лейкограмма крови цыплят, %
|
Показатель |
Группа |
Срок исследования, сут. |
||||
|
1 |
3 |
5 |
7 |
9 |
||
|
Базофилы |
Ⅰ |
2,01±0,52 |
1,32±0,21 |
2,02±0,37 |
1,81±0,40 |
1,53±0,34 |
|
Ⅱ |
2,70±0,42 |
2,51±0,34* |
2,31±0,42 |
1,31±0,21 |
1,72±0,33 |
|
|
Эозинофилы |
Ⅰ |
6,02±0,97 |
7,83±0,48 |
7,33±0,76 |
6,02±0,73 |
8,51±0,76 |
|
Ⅱ |
8,01±0,58* |
8,22±0,48 |
6,74±0,49 |
7,33±0,42 |
7,22±0,48 |
|
|
ПЭ |
Ⅰ |
52,83±1,17 |
58,04±1,37 |
55,72±1,54 |
58,72±2,03 |
55,82±1,66 |
|
Ⅱ |
64,22±1,52* |
58,03±2,11 |
57,50±1,23 |
57,33±1,99 |
58,51±0,92 |
|
|
Лимфоциты |
Ⅰ |
37,52±1,48 |
31,03±1,21 |
32,71±1,12 |
31,54±0,99 |
31,83±0,95 |
|
Ⅱ |
22,71±1,36* |
30,32±1,31 |
31,01±1,24 |
30,72±1,12 |
30,71±0,80 |
|
|
Моноциты |
Ⅰ |
1,70±0,33 |
1,81±0,48 |
2,33±0,42 |
2,01±0,52 |
2,33±0,42 |
|
Ⅱ |
2,50±0,56 |
2,71±0,49 |
2,52±0,67 |
3,31±0,76 |
2,01±0,45 |
|
Примечание: ПЭ – псевдоэозинофилы; * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни при p<0,05.
Различий по количеству псевдоэозинофилов и лимфоцитов в течение всего эксперимента не было обнаружено, за исключением первых суток после отмены препарата. Количество моноцитов оставалось стабильной в обеих группах в течение всего эксперимента.
Фагоцитарную активность и пролиферацию полиморфноядерных лейкоцитов характеризует «Лейкоцитарный индекс интоксикации» (ЛИИ). «Индекс сдвига лейкоцитов крови» (ИСЛК) свидетельствует о величине реакции организма при развитии острого воспалительного процесса.
Выявлено, что у интактных цыплят и цыплят, получавших фурозалидон, согласно значениям «лейкоцитарного индекса интоксикации», низкий уровень эндогенной интоксикации. В группе Ⅱ отмечена положительная динамика этого показателя. «Индекс сдвига лейкоцитов крови» характеризуется определенным превышением нормативных значений в сторону интенсивного гранулоцитоза (табл. 2), что свидетельствует о развитии инфекционно-воспалительного процесса.
Лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс (ИЛГ), позволяет определить этиологию интоксикации и используется для оценки воспалительного процесса (табл. 3). У цыплят, получавших фурозалидон, зафиксирована интоксикация экзогенного происхождения в первый день после отмены препарата. Возвращение этого показателя к нормативным значениям происходит в течение последующего учтённого в эксперименте времени.
Таблица 2 - Динамика индексов эндогенной интоксикации, у.е.
|
Срок исследования, сутки |
Лейкоцитарный индекс интоксикации |
Индекс сдвига лейкоцитов крови |
||
|
Группа Ⅰ |
Группа Ⅱ |
Группа Ⅰ |
Группа Ⅱ |
|
|
1 |
1,11±0,06 |
1,82±0,12* |
1,63±0,12 |
3,11±0,27* |
|
3 |
1,42±0,07 |
1,41±0,08 |
2,12±0,14 |
2,13±0,14 |
|
5 |
1,31±0,08 |
1,43±0,07 |
1,93±0,08 |
2,04±0,12 |
|
7 |
1,51±0,12 |
1,42±0,10 |
2,01±0,11 |
2,01±0,14 |
|
9 |
1,31±0,08 |
1,42±0,06 |
1,91±0,07 |
2,11±0,07 |
Примечание: * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни при p<0,05.
Таблица 3 - Динамика лимфоцитарно-гранулоцитарного индекса, у.е.
|
Срок исследования, сутки |
Группа Ⅰ (контроль) |
Группа Ⅱ (опыт) |
|
1 |
0,61±0,04 |
0,32±0,03* |
|
3 |
0,51±0,03 |
0,51±0,03 |
|
5 |
0,52±0,03 |
0,53±0,03 |
|
7 |
0,51±0,02 |
0,53±0,03 |
|
9 |
0,51±0,02 |
0,52±0,02 |
Примечание: * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни при p<0,05.
Использование «Индекса Кребса» (ИК), «Лейкоцитарного индекса» (ЛИ) и «Индекса иммунореактивности» (ИИР) позволяет оценить неспецифическую реактивность организма цыплят (табл. 4). В качестве косвенного физиологического признака для исследования адаптивного потенциала организма под действием стрессирующих факторов используется «Индекс Кребса». Выявлено стабильное превышение нормативных значений этого индекса в группе цыплят, получавших фурозалидон, с положительной динамикой к девятым суткам после отмены препарата. «Лейкоцитарный индекс» характеризует степень адаптации организма животных к влиянию экзогенных и эндогенных факторов. Установлена корреляция значений «Лейкоцитарного индекса» с показателями «Индекса Кребса»: стабильно снижено в группе Ⅱ, с положительной динамикой во временном тренде.
Показано, что при дифференциальных подсчетах белых кровяных клеток серийные индексы, преимущественно, более информативны, чем изменение численности или, так называемый, «сдвиг влево».
Таблица 4 - Динамика индексов неспецифической реактивности, у.е.
|
Сутки |
Индекс Кребса |
Лейкоцитарный индекс |
Индекс иммунореактивности |
|||
|
группа Ⅰ |
группа Ⅱ |
группа Ⅰ |
группа Ⅱ |
группа Ⅰ |
группа Ⅱ |
|
|
1 |
1,41±0,10 |
2,93±0,22* |
0,71±0,04 |
0,44±0,03* |
31,42±5,6 |
16,61±4,0 |
|
3 |
1,92±0,12 |
1,92±0,14 |
0,51±0,03 |
0,51±0,04 |
27,23±5,1 |
18,62±4,8 |
|
5 |
1,70±0,09 |
1,91±0,11 |
0,61±0,03 |
0,50±0,03 |
20,82±4,8 |
21,82±5,4 |
|
7 |
1,92±0,12 |
1,92±0,13 |
0,51±0,04 |
0,51±0,04 |
25,52±5,7 |
15,84±4,7 |
|
9 |
1,81±0,10 |
1,92±0,06 |
0,61±0,03 |
0,54±0,02 |
20,72±4,1 |
23,62±4,7 |
Примечание: * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни при p<0,05.
Выводы. Результаты анализа гематологических показателей крови свидетельствуют об отсутствии отрицательного воздействия фуразолидона на физиологическое состояние цыплят при выпаивании в первые десять суток жизни в дозе 200 мг/л.
При анализе данных лейкограммы установлен гранулоцитоз у птиц группы Ⅱ, сопровождающийся незначительной псевдоэозинофилией. Расчет лейкоцитарных индексов свидетельствует о несущественных отличиях от нормы в группе Ⅰ. При этом гематологические показатели находились в рамках нормативных значений. Статистически значимых отличий между показателями лейкограммы в группах Ⅰ и ⅠⅠ, к девятым суткам после отмены препарата, не выявлено.
В целом, к девятым суткам после отмены препарата показатели системы крови цыплят группы Ⅱ достоверно не отличались от значений таковых в контрольной группе цыплят, что свидетельствует об отсутствии критичного воздействия фуразолидона на организм птицы при назначении препарата с профилактической целью с водой для поения.
1. Prevalence of fluoroquinolone resistance and mutations in the gyr A, par C and par E genes of Riemerella anatipigtifer isolated from ducks in China / D. Zhu, M. Zheng, J. Xu [et al.] // BMC Microbial. 2019. Vol. 19. P. 274-278. https://doi.org/10.1186/s12866-019-1659-4. EDN: https://elibrary.ru/LDPUAH
2. Закревский В. В., Лелеко С. Н. Оценка риска здоровью, обусловленного содержанием метаболитов нитрофурановых препаратов в мясных продуктах // Профилактическая и клиническая медицина. 2014. № 3. С. 44-50. EDN: https://elibrary.ru/STDILP
3. Колесова Н. Г., Протопопова С. А. Противомикробные порошки. Производные нитрофурана // Материалы VII Международной студенческой научной конференции «Студенческий научный форум». Саратов, 2015. С. 67-70. URL: https://scienceforum.ru/2015/article/2015016723> (15.04.2025).
4. Huyghebaert G., Ducatelle R., Immerseal F. An update on alternatives to antimicrobial growth promoters for broilers // The Veterinary Journal. 2011. Vol. 187. P. 182-188. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.tvjl.2010.03.003.
5. Сравнительная эффективность антимикробных препаратов при экспериментальной Salmonella infantis-инфекции цыплят / А. С. Горбанёва, В. Н. Скворцов, А. Д. Мазур [и др.] // Международный вестник ветеринарии. 2023. № 1. С. 45-49. https://doi.org/https://doi.org/10.52419/issn2072-2419.2023.1.45. EDN: https://elibrary.ru/SMKRAE
6. Кочеровец В. И., Марданлы С. Г. Препараты нифуроксазида в Российской федерации. Сообщение первое: номенклатура и химико-фармацевтические характеристики состава препаратов // Антибиотики и химиотерапия. 2021. Т. 66. № 7-8. С. 90-98. https://doi.org/https://doi.org/10.37489/0235-2990-2021-66-7-8-90-98. EDN: https://elibrary.ru/HMUUZR
7. Определение метаболитов нитрофуранов в мышечной ткани методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием / А. В. Куликовский, И. Ф. Горлов, М. И. Сложенкина [и др.] // Журнал аналитический химии. 2019. Т. 74. № 9. С. 703-709. https://doi.org/https://doi.org/10.1134/S0044450219070168. EDN: https://elibrary.ru/PJZUXB
8. Моисеева А. А., Присный А. А., Скворцов В. Н. Влияние энрофлоксацина на динамику белой крови птиц раннего возраста // Теория и практика ветеринарной фармации, экологии и токсикологии в АПК. Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию кафедры фармакологии и токсикологии СПбГУВМ. Санкт-Петербург, 2021. С. 168-170. https://doi.org/https://doi.org/10.52419/3006-2021-2-168-170. EDN: https://elibrary.ru/UJOXYZ
9. Моисеева А. А. Сравнительное исследование влияния препаратов разных антимикробных групп на лейкоцитарную формулу крови цыплят // Международный вестник ветеринарии. 2023. № 1. С. 79-84. https://doi.org/https://doi.org/10.52419/issn2072-2419.2023.1.79. EDN: https://elibrary.ru/DDDVPI
10. Зайцева А. С. Влияние антистрессовой кормовой добавки на лейкограмму цыплят-бройлеров в условиях транспортного стресса // «Идеи молодых ученых – агропромышленному комплексу: актуальные вопросы ветеринарии и ветеринарно-санитарной экспертизы». Материалы студенческой научной конференции Института ветеринарной медицины. Челябинск: Южно-Уральский государственный аграрный университет, 2022. С. 94-98. EDN: https://elibrary.ru/KROKUE
