p.g.t. Ust'-Kinel'skiy, Samara, Russian Federation
p.g.t. Ust'-Kinel'skiy, Samara, Russian Federation
p.g.t. Ust'-Kinel'skiy, Samara, Russian Federation
GRNTI 68.39 Животноводство
OKSO 36.03.02 Зоотехния
The purpose of the study is to improve the selective supplement for selective media with the purpose to produce enterobacteria. Tasks of the study are to identify the sensitivity of strains obtained of enterobacteria in regard to an-tibiotics; develop a new selective supplement with antibiotics to the nutrient medium Drigalski Lactose Agar. Media should have a content that in the best way possible ensures the growth and reproduction of microorganisms of cer-tain species or family. Intensive biotechnology development and Microbiology allows today to develop new nutrient media and modify the already existing content of media. The object of the study was a new selective additive with antibiotics to the nutrient medium Drigalski Lactose Agar. 253 isolates of bacteria produced from the intestinal mi-crobiotope of different animal species have been the Material for research. The study was conducted in the period from 2010 to 2017. Carbenicillin 30±2.3 from the group of carboxypenicillins and piperacillin 37±2.5 from the group of ureidopenicillins, kanamycin 24±1.5, amikacin 26±1.7 and gentamicin 25±0,8, cefepime 38±3.2 from the group of IV generation cephalosporins, tetracycline 28±1.6, doxycycline 34±2.3 and chloramphenicol 31±2.5, nalidixic acid 37±2.8, trimethoprim 35±3,4 demonstrated the greatest antimicrobial activity against all cultures of enterobac-teria that has been achieved. The high resistance of enterobacteria was shown to benzylpenicillin from the group of natural penicillins, to streptomycin, cephalotine from the group of cephalosporins of the first generation, to polymyx-in B, to ofloxacin (tarivid) and metronidazole. Antibacterial drugs effective against the accompanying gram-positive and gram-negative microflora were considered as the samples of the selective components. Vancomycin from the group of glycopeptides, linezolid from the group of oxazolidinones, and telithromycin from the group of ketolides were chosen. Antibiotics vancomycin and telithromycin in a dose of 0.008 g/dm3, linezolid 0.004 g/dm3 were cho-sen as the selective additive to Drigalski Lactose Agar medium.
antibiotics, medium, additive, nutrient, selective
Совершенствование средств оценки показателей микробиоценоза животных, диагностики, профилактики, лечения незаразных и инфекционных болезней является наиболее значимой задачей, стоящей на сегодняшний день перед ветеринарными специалистами, микробиологами и биотехнологами. Одним из важных элементов в лабораторной диагностике инфекционных болезней является выделение возбудителя в чистой культуре на питательных средах [6, 7, 8].
Среды должны иметь рецептуру, оптимально обеспечивающую рост и размножение микроорганизмов определённого вида или семейства. Интенсивное развитие биотехнологии и микробиологии позволяет сегодня разрабатывать новые питательные среды и модифицировать уже имеющиеся рецептуры сред [1, 2, 3, 4, 5].
В связи с этим, конструирование и производство качественных питательных сред, разработка рецептур новых микробиологических сред и совершенствование уже применяемых сред ‒ одно из важных направлений работы в области биотехнологии, медицинской и ветеринарной микробиологии [6, 7, 8, 9].
Цель исследований – совершенствование селективной добавки к элективным средам для выделения энтеробактерий.
Задачи исследований − выявить чувствительность выделенных штаммов энтеробактерий к антибиотикам; разработать новую селективную добавку с антибиотиками к питательной среде Drigalski Lactose Agar.
Материал и методы исследования. Объект исследований – новая селективная добавка с антибиотиками к питательной среде Drigalski Lactose Agar. Материал для исследований – 253 изолята бактерий, выделенных из кишечного микробиотопа различных видов животных. Исследования проводили в период с 2010 по 2017 гг.
Суспензию биоматериала для получения роста культур энтеробактерий высевали на дифференциально-диагностические и селективно-элективные питательные среды. Суспензию материала распределяли одноразовым стерильным микробиологическим г-образным шпателем по поверхности среды в чашке Петри и инкубировали в термостате при 25-300С, 370С 48-72 ч [10]. Чистые культуры микроорганизмов идентифицировали по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим, серологическим свойствам. Количество выросших колоний микроорганизмов (КОЕ – колониеобразующая единица) на плотных питательных средах проводили общепринятым методом на приборе ПСБ (прибор счёта бактерий).
Определение чувствительности выделенных нами от различных животных изолятов энтерорбактеий к антимикробным препаратам проводили диско-диффузионным методом на среде АГВ и агаре Мюллера-Хинтона. Подбор антибиотиков и создание селективной добавки с антибиотиками к среде Drigalski Lactose Agar осуществляли методом серийных разведений в бульоне МПБ и на Эндо агаре.
Результаты исследований обрабатывали статистически по общепринятой методике с использованием компьютерной программы Microsoft Excel.
Результаты исследований. В процессе разработки новой селективной добавки к питательной среде Drigalski Lactose Agar выявлялась чувствительность энтеробактерий к антимикробным препаратам.
Результаты определения антибиотикочувствительности энтеробактерий к пенициллинам (ампициллин № 1, бензилпенициллин № 2, амоксициллин № 3, карбенициллин № 4 и пиперациллин № 5) и аминогликозидам посредством постановки диско-диффузионного теста представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1
Антибиотикочувствительность энтеробактерий к пенициллинам
|
Чистая культура энтеробактерий |
Пенициллины (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
||||
|
№ 1 |
№ 2 |
№ 3 |
№ 4 |
№ 4 |
|
|
Escherichia coli |
16±0,2 |
8±0,1 |
17±0,4 |
22±0,5 |
21±0,6 |
|
Shigella dysenteriae |
18±0,4 |
3±0,07 |
18±0,6 |
23±0,8 |
22±0,5 |
|
Shigella flexneri |
19±0,6 |
2±0,05 |
19±0,7 |
25±0,5 |
21±0,9 |
|
Salmonella Enteritidis |
18±0,4 |
3±0,06 |
17±0,9 |
24±0,7 |
23±0,8 |
|
Klebsiella oxytoca |
20±1,6 |
3±0,04 |
21±0,8 |
24±0,9 |
25±0,7 |
|
Proteus vulgaris |
17±1,3 |
0,7±0,08 |
20±1,2 |
26±1,6 |
28±1,4 |
|
Providencia alcalifaciens |
15±0,4 |
1±0,04 |
18±1,4 |
22±1,8 |
20±1,2 |
|
Hafnia alvei |
20±1,8 |
0,4±0,3 |
19±1,5 |
25±1,8 |
28±1,7 |
|
Morganella morganii |
18±2,5 |
0,5±0,06 |
20±1,3 |
23±1,6 |
27±1,5 |
|
Enterobacter cloacae |
22±1,5 |
0,8±0,2 |
22±1,4 |
28±1,8 |
24±2,3 |
|
Citrobacter freundii |
22±0,8 |
4±0,1 |
21±1,2 |
25±1,6 |
33±2,2 |
|
Serratia marcescens |
18±0,4 |
2±0,08 |
17±1,5 |
21±1,4 |
23±1,8 |
|
Erwinia amylovora |
24±3,8 |
0,4±0,05 |
28±1,7 |
30±2,3 |
37±2,5 |
|
Kluyvera cryocrescens |
17±1,3 |
0,5±0,07 |
16±1,8 |
21±1,5 |
24±2,0 |
|
Yersinia enterocolitica |
3±0,4 |
5±0,06 |
15±0,8 |
21±1,2 |
23±1,3 |
Таблица 2
Антибиотикочувствительность энтеробактерий к аминогликозидам
|
Чистая культура энтеробактерий |
Аминогликозиды (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
|||
|
стрептомицин |
канамицин |
амикацин |
гентамицин |
|
|
Escherichia coli |
16±0,2 |
17±0,1 |
18±0,4 |
15±0,3 |
|
Shigella dysenteriae |
19±0,7 |
22±0,8 |
24±1,2 |
20±0,6 |
|
Shigella flexneri |
17±0,9 |
24±1,5 |
20±1,4 |
22±1,3 |
|
Salmonella Enteritidis |
15±0,5 |
19±0,6 |
22±1,6 |
18±0,2 |
|
Klebsiella oxytoca |
19±1,7 |
23±1,5 |
18±0,9 |
25±2,3 |
|
Proteus vulgaris |
17±1,6 |
20±1,3 |
17±1,3 |
23±2,8 |
|
Providencia alcalifaciens |
18±1,2 |
19±0,8 |
26±1,7 |
21±2,2 |
|
Hafnia alvei |
18±1,2 |
19±1,7 |
21±1,4 |
22±2,6 |
|
Morganella morganii |
19±1,8 |
22±2,6 |
19±1,6 |
23±3,2 |
|
Enterobacter cloacae |
19±1,4 |
22±1,2 |
23±1,7 |
20±1,3 |
|
Citrobacter freundii |
16±0,8 |
17±0,9 |
20±0,8 |
19±0,5 |
|
Serratia marcescens |
18±0,3 |
19±0,5 |
17±1,6 |
20±0,8 |
|
Erwinia amylovora |
22±2,4 |
24±4,2 |
22±1,4 |
19±2,6 |
|
Kluyvera cryocrescens |
15±1,2 |
19±0,7 |
26±1,8 |
22±1,6 |
|
Yersinia enterocolitica |
10±0,3 |
23±0,7 |
16±1,2 |
25±0,8 |
Наибольшую антимикробную активность в отношении всех выделенных культур энтеробактерий проявляли карбенициллин из группы карбоксипенициллинов и пиперациллин из группы уреидопенициллинов, канамицин, амикацин и гентамицин. Высокую устойчивость энтеробактерии проявляли к бензилпенициллину из группы естественных пенициллинов и к стрептомицину.
Результаты определения антибиотикочувствительности энтеробактерий к цефалоспоринам (цефалотин № 1, цефтриаксон (лонгацеф) № 2, цефотаксим (клафоран) № 3, цефепим № 4, цефозопран № 5 и цефквин № 6) в результате постановки диско-диффузионного теста представлены в таблице 3. Результаты определения чувствительности энтеробактерий к к тетрациклину представлены в таблице 4.
Таблица 3
Антибиотикочувствительность энтеробактерий к цефалоспоринам
|
Чистая культура |
Цефалоспорины (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
|||||
|
№ 1 |
№ 2 |
№ 3 |
№ 4 |
№ 5 |
№ 6 |
|
|
Escherichia coli |
10±0,5 |
21±1,2 |
23±1,7 |
25±1,9 |
23±1,6 |
22±1,5 |
|
Shigella dysenteriae |
12±0,8 |
16±1,5 |
18±0,9 |
23±2,2 |
21±1,2 |
20±1,2 |
|
Shigella flexneri |
10±1,3 |
17±0,9 |
19±1,8 |
24±1,4 |
20±1,3 |
19±0,7 |
|
Salmonella Enteritidis |
12±0,9 |
18±1,7 |
18±0,6 |
26±1,7 |
18±0,9 |
18±0,5 |
|
Klebsiella oxytoca |
8±0,5 |
20±1,9 |
17±1,3 |
32±2,3 |
25±1,7 |
23±1,9 |
|
Proteus vulgaris |
10±1,5 |
17±0,7 |
22±2,5 |
26±1,2 |
22±1,2 |
21±2,3 |
|
Providencia alcalifaciens |
12±0,7 |
22±1,2 |
21±2,2 |
28±1,9 |
19±0,7 |
20±0,7 |
|
Hafnia alvei |
10±0,5 |
23±2,3 |
23±1,5 |
30±1,6 |
23±1,4 |
22±1,8 |
|
Morganella morganii |
11±0,6 |
21±1,8 |
20±0,7 |
34±2,3 |
26±1,7 |
28±2,2 |
|
Enterobacter cloacae |
10±0,4 |
20±2,4 |
17±0,4 |
33±2,6 |
22±1,2 |
24±1,6 |
|
Citrobacter freundii |
13±1,7 |
18±0,8 |
16±0,9 |
30±1,8 |
19±1,9 |
25±2,4 |
|
Serratia marcescens |
12±0,8 |
16±0,5 |
19±1,2 |
38±3,2 |
26±1,3 |
30±3,4 |
|
Erwinia amylovora |
10±0,5 |
21±0,9 |
21±1,8 |
37±2,8 |
27±1,4 |
31±2,6 |
|
Kluyvera cryocrescens |
8±0,3 |
20±1,3 |
23±2,5 |
31±2,6 |
22±2,3 |
26±1,8 |
|
Yersinia enterocolitica |
10±0,7 |
15±0,6 |
20±1,7 |
27±1,8 |
20±1,8 |
22±1,5 |
Таблица 4
Антибиотикочувствительность энтеробактерий
|
Чистая культура энтеробактерий |
Антибиотики (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
|||
|
тетрациклин |
доксициклин |
полимиксин В |
хлорамфеникол |
|
|
Escherichia coli |
17±0,3 |
16±0,8 |
18±1,5 |
18±0,7 |
|
Shigella dysenteriae |
19±1,2 |
18±0,5 |
10±0,3 |
25±2,3 |
|
Shigella flexneri |
20±1,6 |
15±0,4 |
12±0,8 |
20±2,6 |
|
Salmonella Enteritidis |
18±0,9 |
14±0,7 |
10±0,6 |
22±1,8 |
|
Klebsiella oxytoca |
24±1,8 |
13±0,9 |
19±1,3 |
31±2,5 |
|
Proteus vulgaris |
27±2,2 |
16±0,5 |
8±0,5 |
26±2,5 |
|
Providencia alcalifaciens |
22±1,4 |
20±1,2 |
10±1,8 |
20±2,3 |
|
Hafnia alvei |
20±0,8 |
18±0,7 |
12±1,2 |
23±1,4 |
|
Morganella morganii |
18±1,5 |
24±1,6 |
8±0,3 |
22±2,4 |
|
Enterobacter cloacae |
19±0,7 |
26±2,4 |
10±1,6 |
21±1,3 |
|
Citrobacter freundii |
25±2,3 |
28±2,7 |
18±1,4 |
19±1,5 |
|
Serratia marcescens |
28±1,6 |
16±1,3 |
12±1,2 |
23±1,6 |
|
Erwinia amylovora |
22±1,5 |
22±2,6 |
13±0,8 |
26±3,6 |
|
Kluyvera cryocrescens |
20±1,3 |
18±0,5 |
14±0,9 |
25±1,8 |
|
Yersinia enterocolitica |
10±0,5 |
34±2,3 |
13±1,5 |
27±2,7 |
Наибольшую антимикробную активность в отношении энтеробактерий проявляли цефепим, тетрациклин, доксициклин и хлорамфеникол. Наибольшая устойчивость энтеробактерии выявлена к цефалотину и к полимиксину В. Результаты определения антибиотикочувствительности энтеробактерий к хинолонам (налидиксовая кислота (невиграмон) № 1, офлоксацин (таривид) № 2 и ципрофлоксацин № 3) представлены в таблице 5. Чувствительность энтеробактерий к метронидазолу
№ 1, фурадонину № 2, ко-тримоксазолу № 3 и триметоприму № 4 приведена в таблице 6.
Наибольшую антимикробную активность в отношении энтеробактерий проявляла налидиксовая кислота и триметоприм. Относительно хорошая устойчивость у большинства энтеробактерии выявлена к офлоксацину (таривид) и метронидазолу.
В ходе выбора селективных компонентов рассматривали антибактериальные препараты, эффективные в отношении сопутствующей грамположительной и грамотрицательной микрофлоры. Были выбраны из группы гликопептидов ванкомицин, из группы оксазолидинонов линезолид, а из группы кетолидов телитромицин.
Таблица 5
Антибиотикочувствительность энтеробактерий к хинолонам
|
Чистая культура энтеробактерий |
Хинолоны (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
||
|
№ 1 |
№ 2 |
№ 3 |
|
|
Escherichia coli |
28±2,2 |
15±1,6 |
26±1,8 |
|
Shigella dysenteriae |
20±1,3 |
16±0,8 |
23±1,5 |
|
Shigella flexneri |
24±1,8 |
20±1,5 |
23±2,5 |
|
Salmonella Enteritidis |
27±1,5 |
22±1,8 |
19±1,2 |
|
Klebsiella oxytoca |
33±2,4 |
18±0,7 |
25±1,6 |
|
Proteus vulgaris |
22±2,8 |
15±0,5 |
20±1,5 |
|
Providencia alcalifaciens |
20±1,2 |
20±2,4 |
24±0,8 |
|
Hafnia alvei |
28±3,4 |
24±3,2 |
20±0,6 |
|
Morganella morganii |
20±3,8 |
17±0,5 |
29±1,4 |
|
Enterobacter cloacae |
26±2,6 |
23±2,5 |
19±0,5 |
|
Citrobacter freundii |
21±1,2 |
28±2,7 |
18±0,7 |
|
Serratia marcescens |
24±1,7 |
16±2,2 |
22±1,8 |
|
Erwinia amylovora |
33±3,6 |
19±1,6 |
20±1,3 |
|
Kluyvera cryocrescens |
23±1,5 |
26±1,8 |
21±0,5 |
|
Yersinia enterocolitica |
37±2,8 |
20±1,2 |
45±3,6 |
Таблица 6
Антибиотикочувствительность энтеробактерий
|
Чистая культура энтеробактерий |
Антибиотики (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
|||
|
№ 1 |
№ 2 |
№ 3 |
№ 4 |
|
|
Escherichia coli |
8±0,8 |
18±1,2 |
17±0,5 |
26±2,3 |
|
Shigella dysenteriae |
6±0,5 |
22±1,9 |
20±1,2 |
28±2,8 |
|
Shigella flexneri |
5±0,4 |
26±2,2 |
25±1,5 |
30±2,6 |
|
Salmonella Enteritidis |
8±1,4 |
15±0,8 |
20±1,6 |
22±1,8 |
|
Klebsiella oxytoca |
10±1,6 |
8±1,8 |
25±3,2 |
24±1,5 |
|
Proteus vulgaris |
12±1,8 |
12±1,3 |
25±3,8 |
28±2,5 |
|
Providencia alcalifaciens |
8±0,8 |
20±1,4 |
25±2,6 |
25±1,8 |
|
Hafnia alvei |
10±1,2 |
18±2,2 |
23±2,5 |
23±2,0 |
|
Morganella morganii |
12±1,5 |
10±3,5 |
27±4,5 |
26±1,7 |
|
Enterobacter cloacae |
10±1,4 |
8±1,4 |
26±1,9 |
27±2,2 |
|
Citrobacter freundii |
8±0,5 |
20±1,6 |
25±1,5 |
30±2,4 |
|
Serratia marcescens |
8±1,2 |
19±0,6 |
22±0,7 |
35±3,4 |
|
Erwinia amylovora |
10±2,2 |
12±1,3 |
37±6,2 |
34±2,6 |
|
Kluyvera cryocrescens |
12±2,6 |
18±1,2 |
21±0,9 |
32±3,6 |
|
Yersinia enterocolitica |
10±1,5 |
28±0,6 |
21±0,7 |
30±2,7 |
Ванкомицин является антибиотиком, ингибирующим биосинтез клеточной стенки бактерий, блокируя синтез пептидогликана. Ванкомицин проявляет активность в отношении большинства грамположительных микроорганизмов, особенно в отношении Staphylococcus spp., Streptococcus spp. и Enterococcus spp., в том числе проявляющих устойчивость к антибактериальным препаратам других групп. Устойчивой резистентности к ванкомицину у грамположительных микроорганизмов не выявлено, за исключением единичных клинических случаев. Ванкомицин не имеет перекрёстной резистентности с другими антибиотиками.
Линезолид ингибирует биосинтез микробного белка по принципиально новому механизму действия, чем существенно превосходит по эффективности макролиды, линкозамиды, хлорамфеникол, тетрациклины и аминогликозиды. Линезолид высоко активен в отношении полирезистентных Staphylococcus spp. и Enterococcus spp., а также в отношении Streptococcus pneumonia, Bacillus spp., Corynebacterium spp., Listeria monocytogenes, Mycobacterium tuberculosis и Rhodococcus spp., Clostridium perfringens, C. difficile, Peptostreptococcus spp., Bacteroides fragilis. К линезолиду проявляют чувствительность и грамотрицательные бактерии Haemophilus influenza, Moraxella catarrhalis, Legionella spp., Bordetella pertussis и B. parapertussis. Линезолид обладает достаточно высокой активностью в отношении чувствительных и устойчивых грамположительных бактерий к оксациллину, аминогликозидам, фторхинолонам, макролидам и гликопептидам.
Телитромицин ингибирует биосинтез микробного белка у грамположительных бактерий (прежде всего у Staphylococcus spp. и Streptococcus spp.), проявляет активность в отношении некоторых грамотрицательных бактерий (Neisseria spp., Haemophilus spp., Legionella spp., Helicobacter spp.), а также высокоактивен в отношении Chlamydia spp., Mycoplasma spp. Телитромицин (кетолид) сохраняет активность в отношении всех штаммов бактерий, устойчивых к макролидам и линкосамидам.
В результате минимальная подавляющая концентрация (МПК) ванкомицина и телитромицина для большинства культур энтеробактерий составляла 0,063 г/дм3, а МПК линезолида была на уровне 0,031 г/дм3. Обильный рост культур энтеробактерий наблюдался при концентрации ванкомицина и телитромицина 0,008 г на дм3 среды, а линезолида в концентрации 0,004 на дм3 среды.
В итоге разработанная селективная добавка к питательной среде Drigalski Lactose Agar включает ванкомицин, линезолид и телитромицин (табл. 7). В связи с этим было решено присвоить данной добавке следующее наименование «Селективная добавка ВЛТ».
Таблица 7
Состав селективной добавки ВЛТ
|
Препараты антибактериальные |
Концентрация, г/дм3 |
|
Ванкомицин |
0,008 |
|
Линезолид |
0,004 |
|
Телитромицин |
0,008 |
Заключение. Наибольшую антимикробную активность в отношении всех выделенных культур энтеробактерий проявляли карбенициллин 30±2,3 из группы карбоксипенициллинов и пиперациллин 37±2,5 из группы уреидопенициллинов, канамицин 24±1,5, амикацин 26±1,7 и гентамицин 25±0,8, цефепим 38±3,2 из группы цефалоспоринов IV поколения, тетрациклин 28±1,6, доксициклин 34±2,3 и хлорамфеникол 31±2,5, налидиксовая кислота 37±2,8, триметоприм 35±3,4. Высокую устойчивость энтеробактерии проявляли к бензилпенициллину из группы естественных пенициллинов, к стрептомицину, цефалотину из группы цефалоспоринов I поколения, к полимиксину В, к офлоксацину (таривид) и метронидазолу. В ходе выбора селективных компонентов рассматривали антибактериальные препараты, эффективные в отношении сопутствующей грамположительной и грамотрицательной микрофлоры. Были выбраны из группы гликопептидов ванкомицин, из группы оксазолидинонов линезолид, из группы кетолидов телитромицин. В состав разработанной селективной добавки к среде Drigalski Lactose Agar введены антибиотики ванкомицин и телитромицин в дозе 0,008 г/дм3, линезолид в дозе 0,004 г/дм3 среды.
1. Ermakov, V. V. (2018). Modifikaciya differencialino-diagnosticheskoi sredy dlya vyiavleniya i differenciaciy en-terobakteriy [Modification of differential diagnostic environment for the detection and differentiation of enterobacte-ria]. Scientific bases for improving the productivity and health of farm animals '18: sbornik nauchnykh trudov - col-lection of proceedings. (pp. 174-179). Krasnodar: Krasnodar state University Research center of animal science and veterinary medicine [in Russian].
2. Pozdeev, O. K, Kuryaeva, N. Yu., Valiullina, A. Z., Karaganov, V. A., & Shulaeva, M. P. (2018). Detekciya beta-laktamaz amrsuklinicheskikh izolyatov enterobakterii [Detection of beta-lactamase amrsuclinic enterobacteria iso-lates]. Prakticheskaya medicina - Practical medicine, 1 (112), 148-152 [in Russian].
3. Paramonova, N. Yu. , Kuzmichyov, V. V., & Yakubovskaya, M. Yu. (2017).Monitoring rasprostraneniya anti-mikrobnoi rezistentnosti v Kostromskoi oblasti [Monitoring of spreading of antimicrobial resistance in the Kostroma region]. Innovacii v APK: problemy i perspektivy - Innovations in Agricultural Complex: problems and perspectives, 4 (16), 160-163 [in Russian].
4. Strebkova, V. V., Zatolokin, O. N., Starkova, M. S., & Kalinina, M. I. (2017). Dinamika rasprostraneniya karba-penemaz gramotricatelinykh bakterii v otdeleniyakh Voronezhskoi gorodskoi klinicheskoi bolnicy skoroi medicinskoi pomoshchi № 10 [Dynamics of spread of carbapenemases of gram-negative bacteria in the depart-ments of the Voronezh City Clinical Emergency Hospital № 10]. Mnogoprofilinyi stacionar. Multidisciplinary Hospital - Versatile hospital, Vol. 4, 1, 19-21 [in Russian].
5. Tapalsky, D. V., Osipova, V. A., Evseenko, E. O., Savelieva, A. K., Kozlovskaya, I. V., & Kozik, A. P. et al. (2017). Metallo-beta-laktamazy i karbapenemazy ekstremalino-antibiotikorezistentnykh enterobakterii: rasprostranenie v Belarusi [Metal-beta-lactamase and carbapenemases of extremely antibiotic-resistant enterobacteria: spread in Belarus]. Zdravoohraneniye (Minsk) - Healthcare (Minsk), 3, 40-47 [in Russian].
6. Shelepin, A. P. (2016). Sovremennoye sostoyaniye i tendencii v razrabotke, proizvodstve i primenenii pitate-linykh sred [Current status and trends in the development, production and use of culture media]. Bakteriologiya - Bacteriology, Vol. 1, 1, 42-47 [in Russian].
7. Shelepin, A. P. (2015). Sovremennoye sostoyaniye i napravleniya razvitiya proizvodstva pitatelinykh sred v Rossii [The current state and directions of development of production of nutrient media in Russia]. Sovremennaya laboratornaya diagnostika - Modern laboratory diagnostics, 2 (16), 18-20 [in Russian].
8. Shilova, A. N., Ilyina, V. N., Subbotovskaya, A. I., Kozyreva, V. S., Strunin, O. V., & Lomivorotov, V. V. (2016). Harakteristika enterobakterii s mnozhestvennoi rezistentnostiyu, koloniziruyushchih kishechnyi trakt u detei ranne-go vozrasta s vrozhdyonnymi porokami serdca pri postuplenii v kardiohirurgicheskii stacionar [Characteristics of multi-resistance enterobacteria that colonize the intestinal tract in young children with congenital heart defects when admitted to a cardiac hospital]. Klinicheskaya mikrobiologiya i antimikrobnaya himioterapiya - Clinical Micro-biology and Antimicrobial Chemotherapy, Vol. 18, 1, 68-74 [in Russian].
9. Elenshleger, A. A., & Afanasef, V. A. (2017). Vliyanie preparata «Vetom 2» na mikrobnyi peizazh kishechnika u teliat posle antibiotikoterapii [The influence of Vetom 2 on the microbial intestinal landscape in calves after antibi-otic therapy]. Vestnik Altaiskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta - Bulletin of Altai State Agrarian Univer-sity, 2 (148), 126-132 [in Russian].
10. Ermakov, V. V. (2016). Odnorazovyi sterilinyi mikrobiologicheskii g-obraznyi shpatel [One-time sterile micro-biological g-shaped rod]. Patent 163081, RussianFederation, 2016100537/14 [in Russian].
