ФГБУ «Всероссийский научно-исследовательский институт лесной генетики, селекции и биотехнологии» (старший научный сотрудник)
г. Воронеж, Россия
г. Воронеж, Россия
Воронеж, Воронежская область, Россия
Проведены исследования влияния биостимуляторов (Cупер-Гумисола, Рибав-Экстра и Фито-спектра) на всхожесть семян и рост сеянцев сосны обыкновенной и ели европейской в открытом грунте питомника. Изучен цитологический механизм действия биостимуляторов на хромосомный аппарат обработанных семян. Материалом для исследований являлась корневая меристематическая ткань (на разных стадиях прохождения митоза) у проростков семенного потомства ели. На препаратах определяли частоту и спектр (типы) патологий митоза, которые учитывали в метафазе, анафазе и телофазе митоза клеток корневой меристемы.
цитогенетический механизм влияния биостимуляторов на проростки семян, патологии митоза, сосна обыкновенная, ель европейская
DOI: 10.12737/article_5967e99d91f917.53325147
УДК 630*165.6+630*232.31
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ ВЛИЯНИЯ БИОСТИМУЛЯТОРОВ РОСТА НА ПРОРОСТКИ
СЕМЯН ЕЛИ ЕВРОПЕЙСКОЙ (Picea exelsa Link.) И СОСНЫ ОБЫКНОВЕННОЙ (Pinus silvestris L.)
Л. С. Мурая1
кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник Л. А. Рязанцева2
кандидат сельскохозяйственных наук, доцент А. И. Сиволапов3
1 – ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет», г. Воронеж, Российская Федерация
2 – ФГБУ «Всероссийский НИИ лесной генетики, селекции и биотехнологии», г. Воронеж, Российская Федерация
3 – ФГБОУ ВО «Воронежский государственный лесотехнический университет им. Г.Ф. Морозова»,
г. Воронеж, Российская Федерация
Для получения качественного посадочного материала ели европейской и сосны обыкновенной использованы биостимуляторы роста. Проведены исследования влияния биостимуляторов (Cупер-Гумисола, Рибав-Экстра и Фито-спектра) на всхожесть семян и рост сеянцев сосны обыкновенной и ели европейской в открытом грунте питомника. Изучен цитологический механизм действия биостимуляторов на хромосомный аппарат обработанных семян. Материалом для исследований являлась корневая меристематическая ткань (на разных стадиях прохождения митоза) у проростков семенного потомства ели. На препаратах определяли частоту и спектр (типы) патологий митоза, которые учитывали в метафазе, анафазе и телофазе митоза клеток корневой меристемы. Частота патологий митоза вычислялась как отношение числа клеток с патологиями в мета-, ана-, телофазе митоза к общему числу просмотренных делящихся клеток (на тех же стадиях), в %. Спектр патологических митозов представлен как процентное отношение каждого вида патологий к общему числу патологических митозов. Учитывали число клеток с разным соотношением микроядер. Семена сосны обыкновенной показали большую устойчивость к воздействию биостимуляторов роста, чем ели европейской. У них выявлено меньше патологических митозов и микроядер, в сравнении с семенами ели европейской. Биостимуляторы роста Супер-Гумисол 10 мл/л и Фитоспектр 1.0 мл/л (ель европейская) избирательно влияют на семена, что проявилось в значительной индивидуальной изменчивости: в проростках одних семян наблюдали достаточно серьезные отклонения от нормы (наличие патологических митозов, микроядер), частота появления которых достигала 7-9 %, в пролиферирующих тканях других проростков видимых аномалий не обнаружено или выявлено в небольших количествах. Биостимуляция роста посадочного материала – это сложный процесс, который может привести как к положительным результатам, так и неблагоприятным последствиям. Семена сосны обыкновенной показали большую устойчивость к воздействию биостимуляторов роста, чем ели европейской. У них выявлено меньше патологических митозов и микроядер, в сравнении с семенами ели европейской.
Ключевые слова: цитогенетический механизм влияния биостимуляторов на проростки семян, патологии митоза, сосна обыкновенная, ель европейская.
THE CYTOGENETIC MECHANISM OF THE INFLUENCE OF GROWTH BIOSTIMULATORS ON SEEDLINGS OF NORWAY SPRUCE (Picea exelsa U) and SCOTS PINE (Pinus silvestris L.) SEEDS
L S. Muraya1
PhD in Biology, Leading researcher L. A. Ryazantseva2
PhD in Agriculture, Assosiate Professor A. I. Sivolapov3
1 – Federal State Budget Education Institution of Higher Education «Voronezh State University»,
Voronezh, Russian Federation
2 – Federal state budget institution «All-Russian Research Institute of Forest, Genetics, Breeding and Biotechnology», Voronezh, Russian Federation
3 – Federal State Budget Education Institution of Higher Education «Voronezh State University of Forestry and Technologies named after G.F. Morozov», Voronezh, Russian Federation
Abstract
To obtain high-quality planting material of Norway spruce and Scots pine we have used biostimulants of growth. The effect of biostimulants (Super-Gumesol, Ribav-Extra and Fotospektr) on seed germination and growth of seedlings of Scots pine and Norway spruce in open soil of forest nursery is studied. Cytogenetic mechanism of action of biostimulants on the chromosomal mechanism in the treated seeds is researched. The study material was root embryonic tissue of seedlings in the seed of progeny of spruce. In the preparations the frequency and spectrum of pathological mitosis was determined, which was taken into consideration metaphase, anaphase and telophase of mitotic cells of the root meristem. The frequency of pathological mitosis was calculated as the ratio of the number of cells with abnormalities in the meta-, ana-, telophase mitosis to the total number of viewed dividing cells (at the same stages), in %. Spectrum of pathological mitoses is presented as the percentage of each type of pathology to the total number of pathological mitoses. Number of cells with different ratios of microkernels was taken into consideration. Seeds of Scots pine showed a greater resistance to the effects of biostimulants of growth than Norway spruce seeds. They revealed less of abnormal mitoses and micronuclei in comparison with seeds of Norway spruce. Super-Gumesol growth biostimulants 10 ml/l and Fotospektr 1.0 ml/l have selective influence on the seeds: spruce seedlings of some seeds were observed with serious deviations from the norm; the frequency of occurrence of abnormal mitoses, micronuclei has reached 7-9 %, in other proliferating tissues of seedlings visible anomalies are not detected or detected in small amounts. Bio-stimulation of growth of planting material is a complex process that can lead to positive results, and adverse effects. Seeds of Scots pine showed a greater resistance to the effects of biostimulants of growth than Norway spruce. They revealed less of abnormal mitoses and micronuclei in comparison with seeds of Norway spruce.
Keywords: cytogenetic mechanism of the influence of biostimulants on seed seedlings, pathology of mitosis, Scotch pine, Norway spruce.
Введение
Выращивание посадочного материала хвойных пород в открытом грунте лесных питомников – достаточно трудоемкий процесс, во многом зависящий от внешних факторов (наличие питательных веществ, достаточное содержание гумуса, оптимальной влажности почвы, освещенности и температуры воздуха), меняющихся в течение сезона. В данной ситуации можно повысить плодородие почвы путем внесения органических и минеральных удобрений и применить ряд перспективных агроприемов (обработка семян стимуляторами и микроэлементами перед посевом, а также внекорневые подкормки минеральными удобрениями и биостимуляторами, освобождение полей от сорняков, проведение профилактических мероприятий по обработке сеянцев фунгицидами), позволяющих повысить иммунитет к болезням и ускорить их рост.
В настоящее время в технологии выращивания посадочного материала из семян недостаточно используются передовые агротехнические приёмы, включающие в себя применение новых биологических и химических средств для стимуляции роста сеянцев.
Научные разработки последних лет показали, что при выращивании сеянцев и саженцев ценных хвойных пород (ель, сосна, лиственница, кедр, пихта и др.) можно успешно использовать стимуляторы роста на различных стадиях их развития, как при предпосевной обработке семян, так и внекорневой обработке сеянцев. Поэтому активно ведется поиск и испытание новых биостимуляторов [1].
Нами проведены исследования влияния биостимуляторов (Cупер-Гумисола, Рибав-Экстра, Фитоспектра и др.) на всхожесть семян и рост сеянцев сосны обыкновенной и ели европейской в открытом грунте питомника [7]. Большой интерес представляет механизм действия биостимуляторов на хромосомный аппарат обработанных семян и сеянцев.
Характеристики использованных стимуляторов приведены ниже:
Супер-Гумисол – жидкий высококонцентрированный препарат, биостимулятор нового поколения. Содержит в себе все легкоусвояемые питательные вещества, гуматы, фульвокислоты, аминокислоты, природные фитогормоны, ростовые вещества, микроэлементы в хелатной форме и полезную почвенную микрофлору. Применяется для предпосевной обработки семян и подкормки растений во время всего вегетативного периода. Расход при опрыскивании 1 кг/1 л на 1 гектар. Супер-Гумисол совместим с любыми пестицидами. Природные фитогормоны и полезная почвенная микрофлора повышают всхожесть, увеличивают энергию прорастания семян, стимулируют корнеобразование, рост и развитие растений.
Препарат получен из натурального экологически чистого сырья (Вермикомпост – Биогумус) с применением современных микробиологических технологий, которые придают ему уникальные свойства. Супер-Гумисол является высокоэффективным природным антистрессовым адаптогеном, который способен мобилизовать защитные силы и сохранить высокую продуктивность растений в экстремальных природных условиях. Поставщик ООО «Агроэкосервис» (Москва).
Рибав-Экстра – природный комплекс биологически активных веществ, экстракт продуктов метаболизма микоризных грибов, выделенных из корней женьшеня. Выпускается в виде 60 %-го спиртового экстракта.
Обладает очень высокой корнеобразующей активностью и способствует быстрому восстановлению растений после биологических повреждений (угнетение болезнетворными микроорганизмами, гербицидами, неблагоприятное воздействие внешней среды). Препарат обладает выраженным антистрессовым и лечебным действием: его используют для восстановления всех видов культур, поврежденных и ослабленных засухой, заморозками, болезнями и вредителями.
Фитоспектр – универсальный регулятор роста растений со свойствами фунгицида и комплексного удобрения. Представляет собой водный раствор, содержащий гликозиды экстрактов растений и функциональные добавки. Основу препарата составляют вещества, обладающие широким спектром биологического действия: фунгицидной, антимикробной, противовирусной, инсектицидной активностью, благодаря чему усиливается устойчивость растений к стрессовым факторам среды, обеспечивается их естественная защита и повышается усвояемость питательных веществ. Компоненты препарата стимулируют рост бактерий, ускоряющих образование гумуса, способствуют образованию комковатой структуры, улучшая тем самым аэрацию и влагоудержание в почве. Препарат Фитоспектр рекомендуется применять в качестве биотехнического средства для улучшения питания растений. Используется в виде водных растворов путем их полива и опрыскивания, а также при замачивании семян.
Карвитол, ВР – ацетиленовый спирт, регулятор роста растений, экологически безопасный препарат (класс опасности 4/3), номер государственной регистрации 0774-07-111-240-0-1-3-1, выпускается ОАО «МХК «ЕвроХим». Используется для предпосевной обработки семян (повышает полевую всхожесть) и опрыскивания растений (усиливает ростовые процессы).
Материал и методы
Цитологический анализ на прохождение митоза при формировании меристиматической ткани проростков семенного потомства проводился у ели европейской и сосны обыкновенной. Материалом для исследований являлась корневая меристематическая ткань (на разных стадиях прохождения митоза) у проростков семенного потомства ели и сосны. Материал фиксировали в спиртово-уксусной смеси (3:1). Постоянно-давленые микропрепараты, окрашенные ацетогематоксилином, изготавливали по методике Топильской и др. [8]. Просмотр микропрепаратов осуществлялся на микроскопе Микмед -2 при увеличении 40 × 1,5 × 10. Микрофотосъемку проводили с использованием видеоокуляра DCM500 (Shangrao TeleView Optical Instruments Co., Ltd.).
На препаратах определяли частоту и спектр (типы) патологий митоза (ПМ), которые учитывали в метафазе, анафазе и телофазе митоза клеток корневой меристемы. Частота патологий митоза вычислялась как отношение числа клеток с патологиями в мета-, ана-, телофазе митоза к общему числу просмотренных делящихся клеток (на тех же стадиях), в %. Спектр патологических митозов представлен как процентное отношение каждого вида патологий к общему числу патологических митозов. Учитывали число клеток с разным соотношением микроядер [2, 3, 4, 5, 6, 9, 10, 11].
Результаты и обсуждение
На основании полученных результатов были сделаны выводы о целесообразности использования того или иного стимулятора.
Цитогенетическая характеристика семян ели и сосны, подверженных воздействию биостимуляторов роста, предусматривает цитологический анализ поведения хромосом в митозе в активно пролиферирующих тканях проростков. Особое внимание митозу уделяется потому, что он является необходимым процессом почти всех этапов онтогенеза. Патологии митоза могут вызываться разными компонентами воздействия на клетку, в том числе и биостимуляторами роста. С целью выяснения влияния биостимуляторов на рост и развитие организма изучали характер поведения хромосом в митозе у проростков семян ели и сосны.
Проведен цитологический анализ поведения хромосом в митозе у проростков семян ели европейской Picea exelsa Link. и сосны обыкновенной Pinus silvestris L.
Анализ поведения хромосом в активно пролиферирующих тканях проростков ели европейской выявил полиморфизм по частоте появления клеток с аномальным митозом (табл. 1).
После обработки семян биостимулятором Супер-Гумисол (10 мл/л) выявлен значительный полиморфизм по частоте появления аномальных клеток у разных проростков. Об этом свидетельствует и широкий размах предела варьирования (от 0 до 14.2 %). Индивидуальная изменчивость по цитологическим показателям подтверждается и результатами сезонной изменчивости роста (по высоте) 3-летних сеянцев. У одной группы проростков частота появления аномалий была небольшой (2.9 %, 2.2 %, 3.4 %), у другой группы достигала 14 %. Встречались отклонения типа обособления групп хромосом в метафазе, мосты, которые появлялись в анафазе и в некоторых клетках сохранялись до поздней телофазы, фрагменты мостов, забегания хромосом в анафазе, обособление групп хромосом в телофазе (рис. 1). Такие аномалии, если они затрагивают большое число клеток в организме (высокая частота встречаемости патологических митозов), в конечном итоге могут приводить к формированию слабо развитых или нежизнеспособных семян. С другой стороны, наличие в данной группе достаточного количества проростков с нормальным формированием генотипов (небольшая частота появления аномальных клеток), свидетельствует о том, что данный стимулятор роста является перспективным. Здесь необходимо проводить более тщательный подбор концентрации обрабатываемого раствора.
После обработки семян стимулятором роста Рибав – Экстра 1.0 (мл/л) проростки семян характеризуются относительной стабильностью генома. В данной группе наблюдается самая низкая частота появления аномалий (табл. 2). Из отклонений от нормы обнаружены мосты, фрагменты мостов и микроядра с низкой частотой появления микроядер – 0.5 %.
После обработки семян биостимулятором Фитоспектр (1.0 мл/л) выявлен размах аномалий. Частота патологических митозов составила 4-9 %. У проростков этой группы чаще всего можно было видеть нарушения
Таблица 1
Особенности поведения хромосом в митозе у проростков семян ели европейской (Picea exelsa Link.), обработанных биостимуляторами роста
|
Концентрация стимулятора, мл/л |
Патологии митоза, % |
Микроядра, % |
||||
|
метафаза |
анафаза |
телофаза |
пределы варьирования min-max, % |
|
пределы варьирования min-max, % |
|
|
Супер-Гумисол (10,0) |
7.17± 0.800 |
7.02± 1.200 |
7.32±1,300 |
0 – 14.2 |
2.55±0.700 |
0 – 7 |
|
Рибав-Экстра 1,0) |
3.14±0.800 |
2.5± 0.500 |
2.40 ±0,300 |
0 – 7.7 |
0.5 ±0.10 |
0 - 1 |
|
Фитоспектр (1,0) |
4.8±1.20 |
9.2±2.10 |
7.70 ±1,500 |
0 -18.0 |
3.3±0.90 |
0 -8.8 |
|
Фитоспектр (0,05) |
8.0 ±1.40 |
4.4±1.10 |
4.50±0,900 |
0 – 8.3 |
3.9±0.70 |
0-7 |
|
Контроль |
1.43 ±0.600 |
1.67±0.700 |
1.36±0,400 |
0 – 6.6 |
0.01±0.010 |
0 – 0.1 |
|
а |
б |
в |
|
г |
д |
е |
|
ж |
з |
и |
|
к |
л |
м |
Рис. 1. Патологии митоза, выявленные в проростках семян ели европейской и сосны обыкновенной, обработанных
биостимуляторами роста: а – обособление группы хромосом в анафазе; б – мост в телофазе; в – забегание хромосом
в анафазе; г, д, ж – по 1 микроядру на клетку; е – множественные мосты в телофазе; з –3 микроядра в одной клетке;
и, л, м – выбросы хромосом за веретено деления в метафазе; к – задержка хромосом на экваторе в анафазе
Таблица 2
Особенности поведения хромосом в митозе у проростков семян сосны обыкновенной, обработанных
биостимуляторами роста
|
Концентрация стимулятора, мл/л
|
Патологии митоза,% |
|
Микроядра, % |
|||
|
метафаза |
анафаза |
телофаза |
пределы варьирования min-max, % |
|
пределы варьирования min-max, % |
|
|
Супер-Гумисол (10,0) |
1.36± 0.700 |
1.36± 0.700 |
3.42±0.800 |
0 – 6.6 |
1.59±0.800 |
0 – 7.4 |
|
Рибав-Экстра (1,0) |
0.85±0.400 |
0.9± 0.40 |
0 |
0 – 4.0 |
0 |
0 |
|
Фитоспектр (1,0) |
0.58±0.300 |
1.43±0.500 |
0 |
0 – 4.0 |
0.6±0.200 |
0 -1.5 |
|
Фитоспектр (0,05) |
1.81±0.600 |
1.81±0.400 |
2.6±0.50 |
0 – 5.0 |
1.47±0.500 |
0-4 |
|
Контроль а) |
1.16±0.500 |
2.55±0.400 |
2.5±0.80 |
0 – 6.0 |
1.5±0.400 |
0 - 4 |
|
Контроль б) |
0 |
0.44±0.300 |
0.34±0.200 |
0 – 2.2 |
0.01±0.010 |
0 – 0.1 |
Примечание: а) видимые небольшие отклонения; б) митоз без видимых или незначительных отклонений
связанные с повреждением хромосом: мосты, забегания хромосом в метафазе, микроядра (рис. 1, е, в, г).
Характерной особенностью для всех опытных вариантов явилось появление микроядер.
Микроядра можно было наблюдать на всех стадиях митоза. Значительное количество их присутствовало в интерфазных клетках. Чаще всего в патологической клетке встречается одно микроядро, но иногда мы наблюдали клетки с 2, 3 и 4 микроядрами (рис. 1).
Наибольшая частота появления микроядер выявлена у проростков семян, обработанных биостимулятором Фитоспектр (1.0 и 0.05 мл/л) от 3.3 ± 0.9 до 3.9 ± 0.7 % соответственно.
Микроядра – это дополнительные к ядру мелкие округлые хроматиновые структуры, которые появляются вследствие нарушений хромосомного аппарата делящейся клетки, основой которого являются молекулы ДНК. Такие нарушения могут быть спровоцированы как внешними, так и внутренними причинами. Образование микроядер служит показателем нестабильности генома, отражением протекающих в клетках мутаций. В настоящее время микроядерный тест получает широкое распространение в исследованиях, как животных, так и растительных клеток. Сходные картины поведения хромосом в митозе наблюдали и у проростков семян, которые обработаны тем же стимулятором роста, но в другой концентрации (Фитоспектр 0.05 мл/л).
У проростков контрольного варианта видимые отклонения от нормы составили в среднем 1.4 %, что считается в пределах нормы [4]. В основном митоз проходил нормально.
Цитологический анализ поведения хромосом в митозе у проростков семян сосны обыкновенной (Pinus silvestris L)., обработанных биостимуляторами роста идентичен патологическим картинкам ели европейской.
Результаты цитологического анализа хода митоза в меристематических тканях проростков семян сосны обыкновенной, обработанных биостимуляторами роста представлены в табл. 2.
В проростках семян, обработанных биостимулятором Карвитол (0.02 мл/л), в таблице не показано, наблюдается значительная индивидуальная изменчивость. У группы проростков данного варианта митоз протекает без видимых или незначительных отклонений от нормы. В другой группе проростков частота появления патологических митозов достаточно высокая (до 14.5-15.0 %). Из аномалий здесь можно отметить нарушение формирования веретена деления, забегания хромосом (рис. и, м), мосты (рис. б), обособление групп хромосом от веретена деления (рис. а), наличие микроядер в метафазе (рис. л), в интерфазных клетках (рис. 1, ж, д). Обнаруженные патологии могут привести к неравномерному распределению хромосом между дочерними клетками, потере генетического материала, появлению слабо развитых или нежизнеспособных семян. В результате возможно значительное выпадение сеянцев при выращивании их в грунте.
Семена, обработанные биостимулятором Рибав-Экстра (2.0 и 1.0 мл/л), проявили большую устойчивость к воздействию данного препарата. Частота появления у проростков семян патологических митозов низкая (0.6-1.4 % и 0.8-0.9 % соответственно). Во втором варианте микроядер не обнаружено.
Это свидетельствует о том, что биостимулятор роста Рибав-Экстра не оказывает мутабильного влияния на семена.
В двух вариантах при обработке семян биостимулятором Фитоспектр (1.0 мл/л и 2.0 мл/л) наблюдали: частота отклонения от нормы в пределах 2.6 %. Появление более высокого содержания микроядер указывает на нестабильность генома.
Таким образом, семена сосны обыкновенной показали большую устойчивость к воздействию биостимуляторов роста, чем ели европейской. У них выявлено меньше патологических митозов и микроядер, в сравнении с семенами ели европейской.
Биостимуляторы роста Супер-Гумисол 10 мл/л (ель европейская) и Карвитол 0,02 мл/л (сосна обыкновенная) избирательно влияют на семена, что проявилось в значительной индивидуальной изменчивости: в проростках одних семян наблюдали достаточно серьезные отклонения от нормы (наличие патологических митозов, микроядер), частота появления которых достигала 7 %, в пролиферирующих тканях других проростков видимых аномалий не обнаружено или выявлено в небольших количествах.
Обработка семян ели европейской и сосны обыкновенной биостимулятором роста Рибав – Экстра в концентрациях 1.0 мл/л и 2.0 мл/л по данным цитологических исследований не вызывает значительных изменений цитогенетических показателей.
Для того, чтобы дать окончательную оценку применения исследуемых биостимуляторов, необходимо проведение цитогенетического анализа на растениях в процессе онтогенеза в открытом грунте. Для решения данных вопросов перспективным может быть экспресс – анализ «Микроядерный тест», используемый для древесных растений в экстремальных условиях произрастания или с применением биостимуляторов [2].
Выводы
Биостимуляция роста посадочного материала – это сложный процесс, который может привести как к положительным результатам, так и неблагоприятным последствиям.
Доказательной основой выявленного нами положительного результата – стимулирующего эффекта ряда биостимуляторов (Рибав – Экстра, Супер – Гумисол, Фитоспектр и другие) по энергии прорастания и технической всхожести семян, роста, развития и состояния сеянцев ели и сосны на специально заложенных опытных испытательных участках в питомнике ВНИИЛГИСбиотех, ВГЛТУ и на опытных участках плантационных культур сосны и ели, заложенных в Конь-Колодезском лесничестве Учебно-опытного лесхоза.
Применение биостимуляторов в разных дозах и комбинациях осуществлено с использованием разных способов обработки 2- и 3-летних сеянцев (предпосевная, корневая и внекорневая). Опытно-производ-ственная проверка сохранности и приживаемости сеянцев сосны и ели заложенных культур на вырубках в Конь-Колодезском лесничестве показала эффективность использования биостимуляторов. Для закладки плантационных культур использовали 2-летние сеянцы сосны, качество которых соответствовало требованиям действующих стандартов. Минимальные размеры стволика 10 см, толщина у корневой шейки – 1.5-10 мм, длина корневой системы 10-20 см. Максимальные размеры сеянца определяли исходя из возможности обеспечения оптимальных условий посадки на лесокультурную площадь.
Цитогенетические исследования показали, что у большинства вариантов обработанных семян сосны и ели биостимуляторами наблюдаются незначительные нарушения митоза, что дает гарантии их применения для стимуляции всхожести семян и роста сеянцев.
1. Влияние стимуляторов роста природного происхождения на проростки хвойных пород [Текст] / Е. М. Андреева [и др.] // Лесотехнический журнал. - 2016. - № 3. - С. 10-18.
2. Архипчук, В. В. Использование ядрышковых характеристик в биотестировании [Текст] / В. В. Архипчук // Цитология и генетика. - 1995. - Т. 29. - № 3. - С. 6-11.
3. Цитогенетическая характеристика семенного потомства некоторых видов древесных растений в условиях антропогенного загрязнения г. Воронежа [Текст] / А. К. Буторина [и др.] // Цитология. - 2000. - Т. 42. - № 2. - С. 196-201.
4. Буторина, А. К. Шкала чувствительности критериев цитогенетического мониторинга [Текст] / А. К. Буторина, В. Н. Калаев // Цитология. - 1999. - Т. 41. - № 12. - С. 1056-1057.
5. Цитогенетический мониторинг аутохтонных лесов Усманского и Хреновского боров [Текст] / А. К. Буторина [и др.] // Известия РАН. Сер. биологическая. - 2007. - № 4. - С. 508-512.
6. Гераськина, Н. П. Биоиндикационная оценка устойчивости лесных экосистем к промышленному загрязнению среды [Текст] / Н. П. Гераськина // Вестник Воронежского государственного университета. Сер. Химия. Биология. Фармация. - 2007. - № 1. - С. 61-65.
7. Выращивание посадочного материала сосны и ели с использованием новейших биостимуляторов [Текст] / Л. А. Рязанцева, Н. В. Пентелькина, Г. И. Иванюшина, О. С. Слюсарева // Проблемы объектов лесной науки: современное состояние и перспективы: Материалы научно-практической конференции с международным участием, посвященной 40-летию ФБУ «ВНИИЛГИСбиотех» «Достижения и перспективы лесной генетики и селекции», 25-27 апреля 2013 г., Воронеж : НАУКА-ЮНИПРЕСС, 2014. - С. 212-226.
8. Топильская, Л. А. Изучение соматических и мейотических хромосом смородины на ацетогематоксилиновых давленных препаратах [Текст] / Л. А. Топильская, С. А. Лучникова, Н. П. Чувашина // Бюлл. Научн. информ. Центр. генет. лаб. им. И.В. Мичурина, 1975. - Вып. 22. - С. 107.
9. Artyuhov, V. C. Cytogenetic indices of English oak (Quercus robur L.) seminal progeny subject to radioactive radiation in the Chernobyl nuclear disaster and growing on territories with different levels of anthropogenic contamination [Текст] / V. C. Artyuhov, V. N. Kalaev / 20 Years after Chernobyl Accident: past, present and future. New York Nova Science Publishers, 2006. - P. 247-264.
10. Butorina, A. The first detected case of amitosis in Pine [Текст] / A. Butorina, N. Evstratov // Forest Genetics. - 1996. - V.3. - № 3. - P. 137-139.
11. Krajewska, M. Number of nuclei, mitotic activity and cell length in Cladophora sp. thallus treated with cad mium and chromium [Текст] / M. Krajewska // Acta Soc. Bot. Pol., 1996. - Vol. 65. - P. 249-265.
