Целью работы явилась оценка показателей современных методов визуализации сетчатки (оптической когерентной томографии и аутофлюоресценции) и их взаимосвязи с современными электроре-тинографическими методами исследования при болезни Штаргардта, верифицированной молекулярно-генетическими методами. Выявлено, что изменения макулярной электроретинограммы на красный стимул коррелируют с показателями, полученными при спектральной оптической когерентной томографии: обратная корреляционная взаимосвязь высокой степени обнаружена между протяженностью нарушенной линии интерфейса наружных и внутренних сегментов фоторецепторов и амплитудой а-волны макулярной электроретинограммы (г=-0,83, р<0,01), что указывает на взаимосвязь снижения функции фоторецепторов со структурным нарушением зоны сочленения наружного и внутреннего сегмента фоторецепторов. Корреляция между протяженностью поперечного дефекта и амплитудой b-волны макулярной электроретинографммы (г=-0,37, р<0,01) свидетельствует о тесной взаимосвязи между электрогенезом средних слоев сетчатки (биполярных клеток) в фовеа и биометрическими маркерами структурных изменений фоторецепторов при болезни Штаргардта. Отличительным признаком болезни Штаргардта, выявляемым методом спектральной ОКТ, являются гиперрефлективные очажки, локализующиеся в РПЭ, доходящие до наружного ядерного слоя в сочетании с разрушением линии интерфейса наружных и внутренних сегментов фоторецепторов. Особенностью аутофлюоресценции при болезни Штаргардта является сочетание гипофлюоресценции в зоне фовеа с гипофлюоресцирующими пятнами на заднем полюсе. Впервые в российской популяции обнаружены этиологические мутации в гене АВСА4:. rsl800553 (Glyl961Glu), rs61752418 (Aspl093Gly), rs61751374 (Alal038Val), rs201471607 (Asn965Ser), rsl801581 (Arg943Gln), rs75197161 (Gly863Ala delG863), rs76157638 (Arg653Cys) и rs61751392 (Leu541Pro) ABCA4, ассоциированные с болезнью Штаргардта.
The aim of the study was to assess the data concerning the modern methods of retina visualization (optical coherence tomography and autofluorescence) and its interrelation with the data concerning the modern elec-troretinographic methods for research of Stargardt desease, verified with the help of molecular genetic methods. It was found that the shift of macular electroretinogramm to the red stimulus correlates with the parameters of optic coherent tomography: inverse high correlation between the "transverse defect" and a-wave amplitude of macular electroretinogramm (r=-0,83, p<0,01), thus indicating interconnection between lowering of photoreceptor function and structural changes of junction between outer and inner photoreceptor segments. Correlation between the "transverse defect" and b-wave amplitude of macular electroretinogramm (r=-0,37, p<0,01) proves the existence of interrelation between electrogenesis of middle retina layers (bipolar cells) in fovea and biometrical markers of structural changes in photoreceptors caused by Stargardt desease. The hallmarks of Stargardt desease, revealed by the optical coherence tomography, are the hyperreflective spots, localized in retinal pigment epithelium and reaching the outer nuclear layer, together with the damaged interface line of the outer and inner photoreceptors segments. Autofluoresence caused by Stargardt desease demonstrates combination of hypofluorescence in fovea with hypofluorescence in the posterior pole. For the first time the following etiologic mutations of ABCA4 gene, associated with Stargardt desease were revealed in Russian population: rsl800553 (Glyl961Glu), rs61752418 (Aspl093Gly), rs61751374 (Alal038Val), rs201471607 (Asn965Ser), rsl801581 (Arg943Gln), rs75197161 (Gly863Ala delG863), rs76157638 (Arg653Cys) и rs61751392 (Leu541Pro) ABCA4.
Болезнь Штаргардта представляет собой наиболее часто встречающуюся в детском и юношеском возрасте наследственную дегенерацию сетчатки, которая была описана К. Stargardt в начале XX в. Клинически выявляется макулярная дегенерация, которая может сочетаться с желтыми полиморфными очажками, расположенными па-рамакулярно или диффузно рассеянными по заднему полюсу глаза [3]. Болезнь Штаргардта относится к болезням пигментного эпителия сетчатки и фоторецепторов. Тип наследования в подавляющем большинстве случаев -аутосомно-рецессивный [4,6]. Распространенность заболевания, составляет 1:10 000 [2]. Цель исследования - оценить взаимосвязь электроретинографических показателей и показателей методов визуализации при болезни Штаргардта и определить роль этих исследований в диагностике и дифференциальной диагностике верифицированной молекулярно-генетическими методами болезни Штаргардта. Материалы и методы исследования. Нами было обследовано 42 пациента (84) глаза в возрасте 17±8,7 лет с болезнью Штаргардта. Выполнялись визометрия, авторефрактометрия, биомикроскопия, офтальмоскопия. Хроматическая макулярная ЭРГ (М-ЭРГ) на красный, зеленый и синий стимул и другие элек-троретинографические исследования выполнены на ретинографе научно-медицинской фирмы MBN (Россия). 10 человек (20 глаз) были обследованы для визуализации сетчатки и оценки ее структуры методом оптической когерентной томографии (ОКТ) со спектральным интерферометром (спектральной ОКТ), на приборе Spectralis® HRA+ ОСТ (Heidelberg Engineering, Германия). Протоколы сканирования включали волю-метрический скан макулы с центром в фовеа (73 горизонтальных В-скана, покрывающих сверху вниз зону в 4,6 мм). Проводилась качественная оценка структурных изменений сетчатки и количественная оценка толщины центральной сетчатки, тотального макулярного объема и протяженности отсутствующей гиперрефлективной линии сочленения наружных и внутренних сегментов фоторецепторов с использованием стандартного программного обеспечения. Макулярная карта включала центральное поле диаметром 1 мм, внутренние и наружные поля с диаметрами 2,22 мм и 3,45 мм соответственно. Количественные параметры сравнивались с нормативной базой Heidelberg и с опубликованными нормативными показателями Heidelberg-Spectralis® HRA+OCT. Аутофлюоресценция проводилась на ретинальном ангиографе HeidelbergSpectralis® HRA+OCT в режиме стандартной аутофлюоресценции. Статистический анализ производился в программе Statistica 7.0 и включал параметрическую статистику, достоверность различий и коэффициент корреляции Спирмена.Молекулярно-генетические исследования проведены к.м.н. М.Е.Ивановой (ООО «Офтальмик») и В.В Стрельниковым (ФГБУ «МГНЦ РАМН»). Скрининг мутаций в ДНК, экстрагированной из лимфоцитов периферической крови обследуемых, проводили с использованием набора олигонуклеотидных праймеров Ion Ampliseq Inherited Disease Panel (Life Technologies, США). Для параллельного полупроводникового сек-венирования кодирующих областей генов использовали прибор Ion Torrent PGM (Life Technologies, США). Результаты секвенирования проанализированы с использованием программного обеспечения Torrent Suite, в составе: Base Caller (первичный анализ результатов секвенирования); Torrent Mapping Alignment Program -TMAP (выравнивание последовательностей относительно референсного генома NCBI build 37 - hgl9); Variation Caller (анализ вариаций нуклеотидных последовательностей). Аннотация функционального значения генетических вариаций и фильтрация известных полиморфизмов с использованием базы данных dbSNP проведены с помощью компьютерной программы ANNOVAR. Визуальный анализ данных, ручная фильтрация артефактов секвенирования и выравнивания последовательностей осуществлялись с использованием программы Integrative Genomic Viewer - IGV. Результаты и их обсуждение. При офтальмоскопии выявлены следующие офтальмоскопические проявления: макулярная дегенерация без желтых пятен (5 пациентов, 10 глаз), макулярная дегенерация с парафовеальными желтыми пятнами (8 пациентов, 16 глаз) (рис.1 а,б), макулярная дегенерация с желтыми пятнами, расположенными по всему глазному дну (28 пациентов, 56 глаз) (рис.2 а,б) и желтопятнистое глазное дно/ fundus flavimaculatus (1 пациент, 2 глаза).